小鼠原代胰腺腺泡细胞分离提纯的简化方法

来源 :中华胰腺病杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:tianyi666
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目的

探索一种简单、经济的小鼠胰腺腺泡细胞分离提纯的新方法。

方法

采用胶原酶、胰蛋白酶抑制剂溶于DMEM细胞培养液消化小鼠胰腺,DMEM联合4% BSA溶液提纯胰腺腺泡细胞。采用CCK-8法检测胰腺腺泡细胞分泌淀粉酶的能力。

结果

经过消化、水浴、重悬、过滤、沉淀,在2 h内即可快速分离出小鼠原代胰腺腺泡细胞。状态较好的腺泡细胞多呈团状,其基底外侧区域表面呈光滑圆形且没有泡状物,胞质清晰,顶端区域被数百个酶原颗粒包围,颜色较暗,细胞核位于囊泡状区域的基底部。未加CCK-8刺激组腺泡细胞的淀粉酶基础分泌水平约占总淀粉酶分泌水平的2.5%,CCK-8刺激后腺泡细胞分泌的淀粉酶水平升高,在CCK-8浓度为50 pmol/L时达到峰值[(12.83±1.04)%],之后随着CCK-8浓度增加细胞分泌的淀粉酶水平/总淀粉酶水平百分比下降。

结论

本研究改进的方法具有快速、简便、技术难度小、重复性好的特点,是一种简化而又经济的小鼠胰腺腺泡细胞分离纯化新方法。

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