不同激活剂对CD8+T细胞增殖、活化、趋化因子受体表达和杀伤作用的比较研究

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目的 比较刀豆蛋白A(ConA)和免疫激活CD3/28抗体(Anti‐CD3/28)两种不同T细胞激活剂活化的CD8+T细胞在细胞增殖、活化、趋化因子受体表达水平和杀伤活性等方面的效果,为选择一种高效、均一的CD8+T细胞激活剂提供实验依据。方法 C57BL/6小鼠脾脏经过研磨、裂红和免疫磁珠分选后获得CD8+T细胞,分别置于含有ConA、Anti‐CD3/28激活剂的孔板中活化培养,比较2种激活剂对CD8+T细胞的作用。采用流式细胞术(FCM)检测细胞凋亡、活化及趋化因子受体表达水平,采用细胞多因子免疫磁珠检测细胞分泌的细胞因子水平,建立E.G7‐OVA皮下肿瘤模型评估活化CD8+T细胞的靶细胞杀伤效应。结果 使用ConA活化的CD8+T细胞增殖数量[(19.7±1.0)×10~6个]显著高于Anti‐CD3/28组,且短期激活标志物CD69表达上调,但Anti‐CD3/28组CD8+T细胞较ConA组体外杀伤活性更为显著。同时体内肿瘤细胞杀伤实验也证实Anti‐CD3/28组CD8+T细胞杀伤能力更强。2组在趋化因子受体的表达水平上无明显差异。结论 Anti‐CD3/28组CD8+T细胞在体内外杀伤能力较ConA组强,更适用于CD8+T细胞的激活及研究。
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