TNF_α基因在鱼腥藻 71 2 0中的表达及其产物的亲和层析纯化

来源 :植物学报:英文版 | 被引量 : 0次 | 上传用户:bchen2009
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用转入TNF-α基因并稳定有达了4年多的丝状体蓝藻-鱼腥藻7120(Anabaena sp.PCC7120),研究比较了在培养液中氨源(NaNO3)和碳源(NaAc)对转基因灌生长和TNF-α基因的不同影响,氨源能稳定外源蛋白的表达,而碳源则影响细胞壁的合成。通过比较不同的破碎细胞的方法,发现超声破碎得到的可溶性总蛋白含量和TNF-α含量均要比冻融法高出1倍左右,经过细胸破碎、硫酸铵分级沉淀、常压离子交换液相色析后,除去杂蛋白及大量容易堵柱的糖类等物质,最后通过亲和柱层析,分离出了纯的目标蛋白-重组肿瘤坏
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