应用四环素调控系统建立可调控抗恶性疟原虫DNA疫苗的初步研究

来源 :细胞与分子免疫学杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:huanguo12819
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目的: 应用四环素(tetracycline, Tet)可调控系统建立可调控的抗恶性疟原虫的DNA疫苗.方法: 首先构建恶性疟原虫顶端膜抗原1(AMA-1)基因和转录激活因子(tTA或rtTA)基因的真核表达质粒pTL-8/AMA-1和pTL-8/AMA-1(rtTA), 并大量制备这两种质粒及表达转录抑制子(tTS)的质粒pUHS6-1.以pTL-8/AMA-1、pTL-8/AMA-1(rtTA)和pTL-8/AMA-1(rtTA)加pUHS6-1/tTS免疫小鼠后, 用四环素类似物强力霉素(doxcycline, dox)诱导或抑制上述DNA载体内AMA-1的表达, 并分离小鼠血清检测针对AMA-1抗体的表达情况.结果: ①构建了真核表达质粒pTL-8/AMA-1和pTL-8/AMA-1(rtTA); ②pTL-8/AMA-1和pTL-8/AMA-1(rtTA)在没有被诱导表达时(仅基础表达), 可诱导明显的免疫应答.在以pTL-8/AMA-1(rtTA)与含tTS的pUHS6-1共同免疫后, 可极大地降低其免疫应答.应用dox诱导pTL-8/AMA-1(rtTA)中的AMA-1基因表达后, 可明显引起免疫应答.结论: pTL-8/AMA-1(rtTA)附加pUHS6-1构成了可调节的DNA免疫系统.该系统的建立将对进一步深入研究DNA疫苗的免疫机制和调控基因表达, 减少不良免疫反应以及进行可精确调控的基因治疗打下一定的基础.
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