低强度脉冲超声对高糖诱导人牙周膜干细胞损伤的保护作用研究

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目的

探讨低强度脉冲超声对高糖诱导人牙周膜干细胞(hPDLSCs)损伤的保护作用及机制。

方法

体外复苏培养hPDLSCs,分为正常对照组、高糖模型组及低强度脉冲超声30、60、90 mW/cm2组。高糖模型组和低强度脉冲超声组细胞采用高糖培养基(葡萄糖浓度为40 mmol/L)处理48 h,建立高糖模型;正常对照组细胞采用正常培养基(葡萄糖浓度为11 mmol/L)处理。低强度脉冲超声组细胞造模后每天分别给予30、60、90 mW/cm2低频脉冲处理20 min,连续处理7 d。7 d后采用噻唑蓝法测定各组细胞的体外增殖活性,流式细胞术检测各组细胞凋亡及细胞周期分布,荧光比色法检测各组细胞中的半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶(Caspase)-3、Caspase-6和Caspase-9活性,反转录PCR和蛋白质印迹法分别检测各组细胞中Wnt1、Wnt10b及β-连环蛋白(β-catenin)的mRNA和蛋白表达水平。

结果

与正常对照组比较,高糖模型组hPDLSCs的增殖活性明显降低(P<0.05),细胞凋亡率升高(P<0.05),细胞周期变化不明显(均P>0.05),Caspase-3、Caspase-6和Caspase-9活性均明显升高(均P<0.05),Wnt1、Wnt10b及β-catenin的mRNA和蛋白表达均明显降低(均P<0.05)。与高糖模型组比较,低强度脉冲超声组细胞增殖活性升高(均P<0.05),细胞凋亡率降低(均P<0.05),细胞周期变化不明显(均P>0.05),Caspase-3、Caspase-6和Caspase-9活性均降低(均P<0.05),Wnt1、Wnt10b及β-catenin的mRNA和蛋白表达均上调(均P<0.05),且超声强度为90 mW/cm2时上述指标变化最为明显(均P<0.05)。

结论

低强度脉冲超声可明显改善高糖诱导的hPDLSCs损伤,其可能是通过降低Caspase-3、Caspase-6、Caspase-9活性和上调Wnt1、Wnt10b及β-catenin的表达来实现的。

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