【摘 要】
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以基因工程技术制备猴嗜T淋巴细胞病毒Ⅰ型(STLV1)的STLV1-30蛋白作为诊断抗原,建立用于特异性检测实验猴血清中抗STLV1抗体的免疫梳方法.应用原核表达载体pGEX-4T-1构建STLV
【机 构】
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中华人民共和国海口海关,海南海口570311中华人民共和国天津海关,天津和平300457;中华人民共和国哈尔滨海关,黑龙江哈尔滨150000;中华人民共和国重庆海关,重庆渝北400020;中华人民共和
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以基因工程技术制备猴嗜T淋巴细胞病毒Ⅰ型(STLV1)的STLV1-30蛋白作为诊断抗原,建立用于特异性检测实验猴血清中抗STLV1抗体的免疫梳方法.应用原核表达载体pGEX-4T-1构建STLV1 STLV1-30基因的重组表达质粒,并在感受态细胞BL21中表达,将该重组蛋白纯化后作为诊断抗原,建立免疫梳标准化检测程序,并应用于临床检测.结果 显示,最佳抗原包被量为0.02 mg/mL;制备好的免疫梳均能够特异性检测到相应的STLV1阳性血清而不与其他病毒血清间发生交叉反应;该方法能够敏感地检测到1∶400倍稀释的STLV1阳性血清;稳定性和重复性试验结果显示,同一样品重复检测3次,变异系数(CV)均小于10％;利用该检测方法在对11份可疑猴血清样品进行检测,免疫梳方法与ELISA检测结果一致率为100.0％,Kappa=1.000.表明该检测方法具有灵敏度高、特异性强、重复性好等特性,可用于猴T淋巴细胞趋向性病毒Ⅰ型抗体的检测.
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