【摘 要】
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目的选取SARS-CoV N蛋白编码基因为研究对象,构建真核表达质粒PVAX1/N,并在体外转染COS-7细胞的基础上免疫Balb/c小鼠,测定血清总IgG水平及诱发的细胞免疫反应.方法用RT-PCR
【机 构】
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军事医学科学院微生物流行病学研究所免疫室,军事医学科学院微生物流行病学研究所免疫室,西北农林科技大学动物科技学院寄生虫研究室
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目的选取SARS-CoV N蛋白编码基因为研究对象,构建真核表达质粒PVAX1/N,并在体外转染COS-7细胞的基础上免疫Balb/c小鼠,测定血清总IgG水平及诱发的细胞免疫反应.方法用RT-PCR方法从感染SARS病毒的VeroE6细胞中扩增得到约1 269bp的片段,构建重组真核表达质粒PVAX1/N,转染COS-7细胞后,用细胞免疫化学方法鉴定目的蛋白的表达;免疫Balb/c小鼠后,用ELISA方法测血清总IgG水平,MTS/PES比色法测定脾T淋巴细胞增殖,ELISPOT法测定CD8+T淋巴细胞
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