【摘 要】
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目的比较超速离心法、膜亲和法、沉淀法提取血浆外泌体的效率。方法分别采用超速离心法、膜亲和法、沉淀法提取血浆外泌体。采用透射电子显微镜、纳米流式检测仪和动态光散射
【基金项目】
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国家自然科学基金面上项目(81772263);国家自然科学基金面上项目(81972000);国家自然科学基金青年基金(81902139);2017年上海市“上海青年临床医技人才(临床检验专业)培养”资助计划;上海市科学技术委员会临床医学领域研究项目(16411952100);上海市临床重点专科建设项目(医学检验科);复旦大学附属中山医院院内临床研究项目(2018ZSLC05)
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目的比较超速离心法、膜亲和法、沉淀法提取血浆外泌体的效率。方法分别采用超速离心法、膜亲和法、沉淀法提取血浆外泌体。采用透射电子显微镜、纳米流式检测仪和动态光散射法检测外泌体的形态、颗粒数、粒径分布及Zeta电位,采用免疫印迹法鉴定外泌体标志性蛋白的表达,采用二喹啉甲酸(BCA)法测定外泌体蛋白浓度,分析颗粒数/蛋白总量比值以评估外泌体的提取纯度。结果超速离心法、沉淀法和膜亲和法提取的外泌体在透射电子显微镜下均能观察到其立体膜结构,大小为40~100 nm,但沉淀法提取的外泌体混有聚乙二醇(PEG)聚合物及
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