【摘 要】
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以报道的植原体 (Phytoplasma) 1 6SrDNA基因保守序列为依据 ,设计合成了两对引物对R1 6mF2 /R1 6mR2 和R1 6F2 /R1 6R2 ,以甘薯丛枝病 (SPWB)带病植株的叶脉中提取的DNA为模
【机 构】
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西北农业大学基础科学系!杨凌712100,河北农业大学植保系!保定071001,农业部植检所!北京100029,西北农业大学基础科学系!杨凌712100
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以报道的植原体 (Phytoplasma) 1 6SrDNA基因保守序列为依据 ,设计合成了两对引物对R1 6mF2 /R1 6mR2 和R1 6F2 /R1 6R2 ,以甘薯丛枝病 (SPWB)带病植株的叶脉中提取的DNA为模板 ,应用聚合酶链式反应(PCR)技术和巢式PCR(Nested_PCR)技术对甘薯丛枝病病原进行分子检测。结果表明PCR扩增出了 1 .5kb的特异片段 ,在PCR基础上的巢式PCR扩增出了 1 .2kb的特异片段。灵敏度实验显示该方法所需PCR模板DNA量为 0 .1 0 73ng/μl,在PCR基础上的巢式PCR可以将灵敏度提高约 1 0 0 0 0倍 ,所需模板DNA仅为 0 .0 1 0 73pg/μl,在甘薯丛枝病的检测中是一种快速、灵敏、可靠的方法。
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