【摘 要】
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目的探究沉默信息调节因子1(silencing information regulator 1, SIRT1)通过调控相关下游蛋白进而限制流感病毒感染复制的机制。方法通过CRISPR-Cas9技术构建SIRT1敲除的A549细胞系，用甲型流感病毒感染野生型和SIRT1敲除的A549细胞，24 h后收集细胞进行RNA-Seq测序和基因集富集分析(gene set enrichment analysi
【机 构】
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中山大学公共卫生学院(深圳)，广州 510000,中山大学公共卫生学院(深圳)，广州 510000,中山大学公共卫生学院(深圳)，广州 510000,中山大学公共卫生学院(深圳)，广州 510000,
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目的探究沉默信息调节因子1(silencing information regulator 1, SIRT1)通过调控相关下游蛋白进而限制流感病毒感染复制的机制。
方法通过CRISPR-Cas9技术构建SIRT1敲除的A549细胞系，用甲型流感病毒感染野生型和SIRT1敲除的A549细胞，24 h后收集细胞进行RNA-Seq测序和基因集富集分析(gene set enrichment analysis, GSEA)，并通过免疫印迹测定两种细胞系中的流感病毒NP蛋白，以及SIRT1相关功能蛋白在流感病毒感染前后的表达水平。
结果SIRT1敲除的A549细胞系中流感病毒复制增强。高通量测序共检测到2 671个差异表达基因，其中上调和下调差异表达基因分别为2 012和659个。这些差异表达基因主要参与炎症反应与细胞凋亡、天然免疫抗病毒反应以及细胞因子分泌等信号通路。免疫印迹结果显示相比野生型细胞，干扰素诱导的跨膜蛋白3(IFITM3)和自噬蛋白LC3-II在SIRT1敲除细胞系中都存在表达升高程度的下降。
结论SIRT1通过调控下游重要蛋白诸如IFITM3和LC3-II来拮抗流感病毒复制。
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