【摘 要】
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以1株产弹性蛋白酶的铜绿假单胞菌（Pseudomonas aeruginosa）基因组DNA为模板,经PCR扩增得到的铜绿假单胞菌弹性蛋白酶（P.aeruginosa elastase,PAE）基因,与GenBank中的序列对比发
【机 构】
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河北农业大学食品科技学院,中国农业大学食品科学与营养工程学院
【基金项目】
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国家高技术研究与发展计划(863)项目(No.2006AA10Z440);农业部“948”项目(No.2007-Z8)资助
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以1株产弹性蛋白酶的铜绿假单胞菌（Pseudomonas aeruginosa）基因组DNA为模板,经PCR扩增得到的铜绿假单胞菌弹性蛋白酶（P.aeruginosa elastase,PAE）基因,与GenBank中的序列对比发现同源性为99%。成功地构建了重组表达载体pPIC3.5K/PAE,重组质粒SacⅠ线性化后转化毕赤酵母（Pichia pastoris）菌株KM71中,通过PCR和表型鉴定表明,PAE基因已经整合到毕赤酵母染色体上。经大量筛选获得48株含高拷贝的重组毕赤酵母转化子。在甲醇诱导下
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