【摘 要】
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目的 :构建黑色素瘤抗原 1(MAGE 1)基因的真核表达载体 ,并在小鼠黑色素瘤B16细胞中进行表达。方法 :采用分子生物学的手段 ,构建了MAGE 1与增强型绿色荧光蛋白 (EGFP)基因
【机 构】
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目的 :构建黑色素瘤抗原 1(MAGE 1)基因的真核表达载体 ,并在小鼠黑色素瘤B16细胞中进行表达。方法 :采用分子生物学的手段 ,构建了MAGE 1与增强型绿色荧光蛋白 (EGFP)基因共表达的质粒pIRES2 EGFP MAGE 1,通过脂质体以共表达质粒转染B16细胞 ,用荧光显微镜检测细胞中EGFP的表达 ,用免疫组化染色法检测细胞中MAGE 1的表达。结果 :成功地构建了真核表达载体pIRES2 EGFP MAGE 1。以其转染B16细胞后 ,经荧光显微镜及免疫组化染色法检测 ,可见细胞内有EGFP及MAGE 1的表达。结论 :成功地建立了可共表达MAGE 1与EGFP基因的B16细胞 ,为MAGE 1在肿瘤免疫治疗中的应用奠定了研究基础。
Objective: To construct eukaryotic expression vector of MAGE 1 gene and express it in mouse melanoma B16 cells. Methods: The recombinant plasmid pIRES2 EGFP MAGE 1 co-expressing MAGE 1 and enhanced green fluorescent protein (EGFP) gene was constructed by molecular biology method. B16 cells were transfected with co-expression plasmid by liposome, The expression of EGFP was detected by immunohistochemical staining. Results: The eukaryotic expression vector pIRES2 EGFP MAGE 1 was successfully constructed. After transfection of B16 cells, the expression of EGFP and MAGE 1 in the cells was observed by fluorescence microscope and immunohistochemical staining. Conclusion: B16 cells that can co-express MAGE 1 and EGFP gene have been successfully established and laid the foundation for the study of MAGE 1 in tumor immunotherapy.
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