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目的：探索结核分枝杆菌L型的耐药基因rpoB突变与利福平耐药性的关系，以及聚合酶链反应单链构象多态性分析（PCR-SSCP）技术的临床应用价值。方法：收集结核分枝杆菌L型菌株52株，采用PCR-SSCP方法检测rpoB基因，与采用常规药敏试验法检测利福平耐药的结果进行对比分析。结果：采用常规法检测，52株临床分离株中有38株利福平耐药，耐药率为73.08%（38/52）；PCR-SSCP方法对52株临床耐药株rpoB基因突变的检出率为65.38%（32/52），两种方法检测耐利福平的符合率为84.21%。