猪链球菌2型溶菌酶释放蛋白功能性片段的原核表达及其免疫保护性

来源 :中国生物制品学杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:ywqiang
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目的 表达猪链球菌2型(SS2)溶菌酶释放蛋白(MRP)的功能性片段(tmrp),并检测其对小鼠的免疫保护性。方法将构建的重组克隆载体pMD-tmrp经BamHⅠ、EcoRⅠ双酶切,将切下的目的基因tmrp亚克隆至原核表达载体pGEX-3X中,转化E.coli BL21(DE3),鉴定正确后,用IPTG诱导,谷胱甘肽亲和层析纯化GST-tmrp,免疫BALB/c小鼠,测定其免疫保护率。结果阳性工程菌经IFFG诱导,表达了可溶性目的蛋白,相对分子质量约为73000。0.8mmol/L IPTG,37℃,pH
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