hsp90α基因四环素诱导调控表达质粒的构建及功能验证

来源 :中西医结合心血管病杂志（电子版） | 被引量 : 0次 | 上传用户：shuper

【摘要】

：

目的构建Hsp90α基因的单质粒四环素/强力霉素诱导表达系统,并验证其不同表达量对HepG2肝癌细胞增殖的影响。方法通过PCR,分别从pRetroX-Tet-On Advanced质粒和pcDNA3.1-EGFP

【作者】

：

尚冰清周丹朱宏刘昱郭丽丽汤仁仙寇艳波

【机构】

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徐州医科大学免疫与代谢重点实验室,徐州医科大学临床医学系院

【出处】

：

中西医结合心血管病杂志（电子版）

【发表日期】

：

2018年8期

【关键词】

：

四环素基因表达调控 Hsp90α基因 HEPG2细胞

【基金项目】

：

国家自然科学基金青年基金(81700774),江苏省大学生创新创业训练计划项目(201610313037Y),江苏高校品牌专业建设工程一期项目(PPZY2015B161),江苏优势学科资助工程建设项目,徐州医科大学徐州医科大学优秀人才启动基金(D2016018)

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目的构建Hsp90α基因的单质粒四环素/强力霉素诱导表达系统,并验证其不同表达量对HepG2肝癌细胞增殖的影响。方法通过PCR,分别从pRetroX-Tet-On Advanced质粒和pcDNA3.1-EGFP质粒中扩增rtTA表达盒和EGFP基因,依次将rtTA和EGFP基因克隆入pTRE-Tight载体中,pRetroX-Tight载体中,获得EGFP标记的Tet-on单质粒系统。基于本系统,构建DOX诱导的Hsp90α表达质粒pRetroX-Hsp90α-EGFPTet-On,然后采用脂质体转染H

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