论文部分内容阅读
应用PCR法扩增了脑型一氧化氮合酶(nNOS) 的钙调蛋白CaM结合区基因，将扩增出的0.6kb DNA片段经NdeI/EcoRI酶切，重组于表达载体pET/28a(+)质粒中，用电穿孔法导入E.Coli，筛选获得基因工程菌。在IPTG诱导下，目的蛋白在工程菌的表达量为菌体蛋白的15％～20％，应用His、Tagsepharose金属螯合亲和层析和SDS-PAGE纯化，获得电泳纯的目的蛋白、相对分子质量为22 000，以它为抗原，制备了免疫克隆抗血清，经纯化获得高度专一性的nNOS CaM结合区蛋白的抗体