【摘 要】
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目的 设计靶向survivin基因的干涉片段,构建真核表达载体pSUPER/survivin并转染宫颈癌HeLa细胞,探讨siRNA抑制survivin表达对联合γ射线宫颈癌HeLa细胞周期的影响.方法 化学
【机 构】
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大连医科大学附属二院肿瘤放疗科,大连,116027
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目的 设计靶向survivin基因的干涉片段,构建真核表达载体pSUPER/survivin并转染宫颈癌HeLa细胞,探讨siRNA抑制survivin表达对联合γ射线宫颈癌HeLa细胞周期的影响.方法 化学合成干涉引物,退火获得survivin基因的干涉片段,连入pSUPER载体并测序.将测序正确的pSUPER/survivin载体转染HeLa细胞株,RT-PCR法和流式细胞术检测HeLa细胞中survivin基因的表达,流式细胞术检测转染联合γ射线照射后各组细胞的细胞周期数据.结果 本实验成功的构建了pSUPER/survivin载体.转染pSUPER/survivin的HeLa细胞其survivin基因表达水平明显低于未转染的HeLa细胞及转染空载体pSUPER的HeLa细胞.γ射线照射后,转染pSUPER/survivin的HeLa细胞发生了S期细胞比例下降,及G2/M期阻滞.结论 成功的构建了pSUPER/survivin载体,siRNA干涉survivin可以作为提高放射敏感性的潜在分子靶点,通过减少S期细胞比例,促进肿瘤细胞凋亡,通过增加G2/M期阻滞增加放射线的杀伤.
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