外源性分泌性卷曲相关蛋白干预对肾母细胞瘤SK-NEP-1细胞增殖的影响

来源 :中华小儿外科杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:jonasen128
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目的 检测肾母细胞瘤SK-NEP-1细胞中Wnt通路分泌性卷曲相关蛋白(sFRP-1)基因及相关基因的表达;探讨不同浓度sFRP-1蛋白对细胞增殖的影响及可能的机制.方法 RT-PCR方法检测肾母细胞瘤细胞株SK-NEP-1细胞及肾胚胎细胞293细胞中Wnt通路相关分子sFRP-1、WNT4及β-catenin基因的表达;SK-NEP-1细胞中加入不同浓度的sFRP-1蛋白干预,观察细胞增殖变化,实验分为4组,无干预(对照组);低剂量组:sFRP-1(500 ng/ml);高剂量组:sFRP.1(10μg/ml);高剂量抗体组:sFRP-1抗体(10 μg/ml),分别在干预后0、24、48、72 h用CCK-8试剂检测比较各组细胞的光吸收度值(AV)以评估细胞活力.结果 SK-NEP-1细胞与胚胎293细胞均有sFRP1基因表达,而WNT4基因表达不明显.sFRP-1蛋白干预实验显示,低剂量组及高剂量抗体组干预前后与对照组比较,AV值无明显变化,而高剂量组的AV值在干预24、48 h均较其他组明显降低,分别为对照组的0.82倍和0.79倍,表明细胞增殖受抑制.结论 肾母细胞瘤SK-NEP-1细胞中有sFRP1基因表达;外源性加入低浓度的sFRP-1蛋白并不能对Wnt/β-catenin通路产生影响,只有在加入高浓度的sFRP-1蛋白时才能对SK-NEP-1细胞增殖产生抑制作用。

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