【摘 要】
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目的建立人白细胞介素-10(hIL-10)真核表达系统并观察其在中国仓鼠卵巢(CHO)细胞中的表达.方法用RT-PCR方法自活化的人外周血淋巴细胞扩增hIL-10 cDNA,将其克隆至pMD18-T中,
【机 构】
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中国疾病预防控制中心地方病控制中心克山病研究所,哈尔滨,150086;哈尔滨医科大学第二附属医院普外一科
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目的建立人白细胞介素-10(hIL-10)真核表达系统并观察其在中国仓鼠卵巢(CHO)细胞中的表达.方法用RT-PCR方法自活化的人外周血淋巴细胞扩增hIL-10 cDNA,将其克隆至pMD18-T中,测序正确后,再定向插入至真核表达载体pCIneo中,经脂质体介导转染CHO细胞,检测其在细胞内外的表达和分泌并进行活性检测.结果RT-PCR扩增的hIL-10 cDNA序列与GenBank中hIL-10cDNA序列一致;构建了真核重组表达载体pCIneo-hIL-10;转染CHO细胞后可检测到具生物活性的hIL-10的转录和表达.结论成功构建了hIL-10真核表达系统,为今后的临床研究及基因工程药物生产打下基础.
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