【摘 要】
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利用5-甲基胞嘧啶(5-methylcytosine,5mC)和5-羟甲基胞嘧啶(5-hydroxymethylcytosine,5-hmC)特异性抗体对小鼠原核时期胚胎进行免疫荧光染色。同时使用荧光定量PCR方法检测Te
【机 构】
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吉林大学畜牧兽医学院动物胚胎工程吉林省重点实验室; 内蒙古医学院遗传学教研室;
【基金项目】
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国家基础研究计划项目(2009CB941001);国家自然科学基金资助项目(31072027)
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利用5-甲基胞嘧啶(5-methylcytosine,5mC)和5-羟甲基胞嘧啶(5-hydroxymethylcytosine,5-hmC)特异性抗体对小鼠原核时期胚胎进行免疫荧光染色。同时使用荧光定量PCR方法检测Tet(Ten eleven translocation)基因在小鼠早期胚胎中的表达。免疫荧光染色结果显示早期原核阶段(PN1到PN3),雄原核中5mC的含量逐渐减少,而5hmC的含量逐渐增加。但是雌原核中5mC和5hmC的含量基本不变。在原核后期阶段(PN4到PN5)5hmC主要存在于雄原核中。荧光定量结果显示在小鼠MⅡ卵母细胞和植入前胚胎中Tet1和Tet2基因表达量较低,但是Tet3在卵母细胞和原核时期表达量较高,随着胚胎的发育其表达量逐渐降低。结果表明,在小鼠原核时期阶段5mC到5hmC的转变过程主要是由TET3蛋白催化的,并且此过程参与小鼠雄原核的DNA主动去甲基化。
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