人RPE细胞培养、冻存、复苏及传代研究

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目的:建立人视网膜色素上皮(retinalpigigmentepithelium,RPE)细胞体外培养模式,为研究RPE细胞及有关的眼底病防治提供细胞模型和细胞来源。方法:自眼球锯齿缘前2mm处环形剖开眼球,酶消化分离RPE细胞,20%DMEM培养液培养,细胞接近融合状态时进行传代,将处于对数生长期细胞以普通冰箱进行梯度降温后液氮保存,采用改良的速溶方法复苏,1%台盼蓝确定细胞活力,免疫组化染色鉴定细胞来源,作生长曲线观察细胞增殖。结果:原代细胞生长良好,免疫组化染色阳性率为100%,改进冻存复苏方法后,细胞存活率提高20%以上。结论:基本建立了人RPE细胞体外培养模式,改进传统的培养方法后,效果理想。
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