【摘 要】
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目的 探讨先天性小耳畸形残耳软骨细胞体外生长的生物学特性.方法 取先天性小耳畸形患者外耳再造手术中废弃的残耳软骨组织,采用胶原酶消化法获得残耳软骨细胞;体外传代培养
【机 构】
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610072四川,成都,四川省医学科学院四川省人民医院整形外科中国医学科学院北京协和医学院整形外科医院整形七科;
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目的 探讨先天性小耳畸形残耳软骨细胞体外生长的生物学特性.方法 取先天性小耳畸形患者外耳再造手术中废弃的残耳软骨组织,采用胶原酶消化法获得残耳软骨细胞;体外传代培养及生物学特性研究:细胞形态学观察,细胞生长曲线测定,Ⅱ型胶原免疫组化鉴定残耳软骨细胞.RT-PCR检测第1～5代残耳软骨细胞的Ⅱ型胶原及蛋白多糖的mRNA表达.结果 原代和第1～3代残耳软骨细胞生长旺盛,呈多角形,第3代以后细胞体积变大,呈长梭形转化,细胞增殖逐渐减弱;免疫组化检测第2代残耳软骨细胞Ⅱ型胶原表达呈阳性;RT-PCR显示mRNA水平第1～3代软骨细胞Ⅱ型胶原高表达,随传代次数增加表达逐渐减弱,第5代基本消失;第1～3代细胞蛋白多糖呈高表达,第4代以后随传代表达逐渐减弱.结论 体外成功分离培养出残耳软骨细胞,第1～3代细胞形态保持稳定,Ⅱ型胶原和蛋白聚糖稳定呈高表达.
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