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采用双波长替代单波长,对考马斯亮蓝分光光度法测定蛋白质技术进行改进。结果表明:以酪蛋白为标准蛋白,选取600 nm和460 nm为测定波长和参比波长,建立了双波法标准曲线,工作曲线相关系数的平方R2=0.999,检测范围3~250μg/m L;干扰试验和重复实验说明该方法准确性高、稳定性好;利用双波长法测定牛奶样品中蛋白质含量,相对偏差小于2.720%。因此,双波长分光光度法是一种简便、快速、准确、实用的蛋白质含量测定方法。