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目的
探讨牵张应力和小儿体外骨髓间充质干细胞内钙离子变化的关系。
方法原代培养骨髓间充质干细胞，检测其体外增殖能力。利用不同牵张应力对骨髓间充质干细胞进行干预，采用流式细胞仪检测细胞内钙离子浓度的变化，通过Western blot和实时定量聚合酶链反应(Real-time PCR)检测c-Fos、c-Jun、c-Myc蛋白和mRNA的表达。
结果(1)对不同时间牵张应力作用下小儿骨髓间充质干细胞游离钙离子浓度进行检测显示，在刺激5 min时钙离子浓度达到最大值(P＝0.021)，之后逐渐下降。(2)Real-time PCR检测结果显示，c-Fos、c-Jun、c-Myc基因mRNA表达水平在牵张应力刺激0.5 h时显著升高，分别为对照组的(3.28±0.56)、(4.39±0.42)和(6.34±0.46)倍(P＝0.000)，之后随时间延长逐渐减弱，整体呈现出先增强，持续，再减弱的状态。干预4 h，各基因表达水水平基本恢复至干预前的水平。(3)Western blot检测结果显示，牵张应力刺激1 h后，细胞内c-Fos(P＝0.000)、c-Jun(P＝0.015)、c-Myc(P＝0.000)蛋白表达均呈现出明显增强，实验组明显强于对照组。
结论牵张应力会对小儿体外骨髓间充质干细胞内钙离子浓度以及各早期反应基因蛋白的表达产生一定的影响，钙离子通道可能会对各早期反应基因蛋白的活化予以调控。