【摘 要】
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目的 观察曲安奈德(TA)对人视网膜色素上皮细胞衍生因子(PEDF)表达的影响.方法 体外培养人视网膜色素上皮(RPE)细胞,取第4～6代细胞用于实验.分别以浓度为40、400、4×103、4×104μg/L的TA干预12、24、48 h后,采用蛋白质免疫印迹法(Western blot)检测培养液及细胞浆中PEDF蛋白表达水平.采用20 ng/ml的肿瘤坏死因子-α(TNF-α)预干预RPE细胞
【机 构】
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210009,南京,东南大学附属中大医院眼科,210009,南京,东南大学附属中大医院眼科
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目的 观察曲安奈德(TA)对人视网膜色素上皮细胞衍生因子(PEDF)表达的影响.方法 体外培养人视网膜色素上皮(RPE)细胞,取第4～6代细胞用于实验.分别以浓度为40、400、4×103、4×104μg/L的TA干预12、24、48 h后,采用蛋白质免疫印迹法(Western blot)检测培养液及细胞浆中PEDF蛋白表达水平.采用20 ng/ml的肿瘤坏死因子-α(TNF-α)预干预RPE细胞24 h后,再加入400μg/L的TA进行干预(TNF-α预处理组);分别选用20 ng/ml的TNF-α和400μg/L的TA单独干预RPE细胞作为单独干预组.分别作用1、6、24 h后,测定3组细胞培养液及细胞浆中PEDF及细胞浆中磷酸化p38丝裂原活化蛋白激酶(p-p38MAPK)的蛋白表达水平.结果 各TA浓度组RPE细胞培养液及细胞浆中PEDF蛋白表达均升高,其中400μg/L组PEDF蛋白表达最高(P＜0.05).干预1、6、24 h时,TNF-α预处理组和TA单独干预组PEDF蛋白表达均增高、p-p38MAPK蛋白表达均降低(P＜0.01);TNF-α单独干预组PEDF蛋白表达降低、p-p38MAPK蛋白表达增高(P＜0.01).结论 TA能够上调体外培养的人RPE细胞PEDF蛋白表达,下调p-p38MAPK蛋白表达。
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