【摘 要】
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目的: 构建人端粒酶催化亚单位(hTERT)正、反义荧光真核表达载体,并检测其在人胚胎成纤维细胞中的表达. 方法: 采用基因重组技术,将hTERT cDNA正向克隆到荧光真核表达载体pIR
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目的: 构建人端粒酶催化亚单位(hTERT)正、反义荧光真核表达载体,并检测其在人胚胎成纤维细胞中的表达. 方法: 采用基因重组技术,将hTERT cDNA正向克隆到荧光真核表达载体pIRES2-EGFP中,NotI 酶切鉴定;采用脂质法,将重组基因pIRES2-EGFP-hTERT转染入原代培养的人胚胎成纤维细胞;采用激光共聚焦显微镜、RT-PCR及Western blot检测hTERT在胚胎成纤维细胞中的表达. 结果: 经NotⅠ酶切后,hTERT正义重组质粒被切成1.4 kb和7.4 kb 2个片段
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