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【摘 要】本文对丁香苦苷不同给药途径的药物动力学进行研究。方法：采用YMCC18色谱柱（250mm×4.6mm，5μm），水-甲醇-四氢呋喃（62∶34∶4），检测波长为226nm，流速为1.0ml/min，柱温为30℃。丁香苦苷在0.3～19.2μg·mL-1范围内呈良好的线性关系。丁香苦苷平均回收率分别为96.32%。结论：家兔口服丁香苦苷单体后吸收和消除均较快，消除半衰期为0.5小时。家兔静脉注射丁香苦苷单体在体内吸收快，AUC随剂量的增加而成比例的增加，静脉给药的绝对生物利用度为35.1%。
【关键词】丁香苦苷；给药途径；研究
丁香叶具有祛风除湿、止痛的功效[1-6]。丁香叶具有抗病毒作用、增强机体的体液免疫功能、抗菌、耐缺氧能力、抗氧化和抗衰老等作用。丁香叶含有酪醇、3，4-二羟基苯乙醇、对羟基肉桂酸和3，4-二羟基苯甲酸、丁香苦苷、黄柏内酷（obaculactone）、芒柄花素（formonoraetin）、丁香酯素 （syrinaresiol）、咲喃甲酸（2-furancarboxylic acid）、D-甘露醇（D_ mannitol）等成分[7-12]。丁香苦苷有较强的利胆作用[13-15]。丁香苦苷对金黄色葡萄球菌、痢疾杆菌、大肠杆菌及绿脓杆菌均有不同程度的抑菌作用。本文对丁香苦苷不同给药途径的药物动力学进行研究。
1.仪器与试药
（1）仪器：AT-830制冷、加热两用色谱柱温箱（杭州瑞析科技有限公司）、KQ2200E超声波清洗器（上海昨非实验室设备有限公司）、瑞士梅特勒-托利多MS精密天平（梅特勒-托利多中国公司）、TΜ-1901 双光束紫外可见分光光度计（北京普析通用仪器有限责任公司）、722s分光光度计（上海精科有限公司）、德国优莱博TW20通用水浴槽（上海沃珑仪器有限公司）、RC-3药物溶出仪（天津大学无线电厂）。甲醇（济南新世纪石化有限公司）、磷酸（深圳三原化工有限公司）、冰醋酸（深圳三原化工有限公司）、四氢呋喃（河南省新乡市中原有机化工有限责任公司）、磷酸二氢钠（河南省新乡市中原有机化工有限责任公司）、乙腈（济南新世纪石化有限公司）。
（2）色谱柱：YMCC18色谱柱（250 mm×4.6mm，5μm）。
（3）对照品：丁香苦苷 购自中国药品生物制品检定所。
（4）试剂：甲醇、乙腈为色谱纯；水为纯化水，其它试剂均为分析纯。
（5）试药：丁香苦苷。
（6）实验动物 新西兰纯种大白兔，雄性。
2.测定方法确定
2.1色谱条件
依据查阅文献及考查的结果，确定色谱条件如下。流动相：水-甲醇-四氢呋喃（62∶34∶4），检测波长：226nm，流速：1.0ml·min-1。柱温：30℃。理论板数按丁香苦苷峰计算应不得低于3000。
2.2对照品溶液的制备
丁香苦苷对照品溶液：精密称取丁香苦苷对照品3mg，置100毫升容量瓶中，加适量甲醇超声溶解，放置室温，用甲醇定容后，取10毫升置于100毫升容量瓶内，用甲醇定容，即得。
2.3给药
家兔禁食过夜，丁香苦苷单体按100毫克每公斤灌胃给予丁香苦苷单体溶液，分别于给药后0.1小时、0.3小时、0.5小时、0.7小时、0.9小时、1.2小时、1.5小时、1.9小时、2.3小时、2.7小时、3.1小时、3.5小时由耳缘静取血0.5毫升，离心分离出血浆。分别按4毫克每公斤、8毫克每公斤、12毫克每公斤g、16毫克每公斤、20毫克每公斤的剂量给家兔耳缘静脉注射给予丁香苦苷单体溶液，分别于给药后0.1小时、0.3小时、0.5小时、0.7小时、0.9小时、1.2小时、1.5小时、1.7小时由耳缘静取血0.5毫升，离心分离出血浆。
2.4供试品溶液的制备
精密吸取0.4毫升血浆，加人2毫升甲醇，高速离心20分钟，吸取上清液0.2毫升，过滤，既得。
2.5专属性试验
取空白血样，制备制成阴性液，依上述方法测定，结果阴性试验没有干扰，表明本方法专属性良好。
2.6精密度试验
照上述色谱条件，精密吸取丁香苦苷对照品溶液10μl，连续进样6次，记录峰面积。结果，RSD=0.66%，表明本方法精密度良好。
2.7对照品的线性考察
精密称取丁香苦苷对照品3.0mg，置100ml容量瓶中，加入甲醇使溶解并稀释至刻度，摇匀，分别精密吸取0.1、0.2、0.4、0.8、1.6、3.2、6.4mL，置于10mL量瓶中，加空白血浆至刻度，摇匀。分别精密上述溶液吸取10μL，注人液相色谱仪，依照2.1项下的色谱条件测定，记录色谱峰。以峰面积（Y）为纵坐标，对照品进样量（X）为横坐标，绘制标准曲线，计算回归方程。结果表明，丁香苦苷在0.3～19.2μg·mL-1范围内呈良好的线性关系。
2.8重现性试验
称取同一批的丁香苦苷样品6份，按测定方法项下的方法制备供试品溶液，测定含量，并计算样品的RSD值，结果RSD为0.62%，结果表明此方法的重现性良好。
2.9准确度试验
取空白血浆及对照品溶液，制备丁香苦苷低、中、高三浓度的标准血浆样品，代入线性方程计算浓度，以测得值与加入值的比值，计算回收率，平均回收率分别为96.32%，RSD为0.89%。
3.讨论
分别考察水-甲醇-磷酸（50：50：0.01），水-甲醇-冰醋酸（90∶30∶0.12），水-甲醇-四氢呋喃（62∶34∶4），0.1mol/L磷酸二氢钠：乙腈（90∶10）（用磷酸调节pH值至3.0）， 甲醇-乙腈-冰醋酸（60∶40：0.1）不同比例的流动相，结果以甲醇-乙腈-水 （10：15：75）为流动相，供试品各峰分离效果最好，故选用水-甲醇-四氢呋喃（62∶34∶4）为流动相。家兔口服丁香苦苷单体后吸收和消除均较快，消除半衰期为0.5小时.家兔静脉注射丁香苦苷单体在体内吸收快，AUC随剂量的增加而成比例的增加，静脉给药的绝对生物利用度为35.1%。 [科]
【参考文献】
[1]李全，许琼明，郝丽莉，陆冰芬，杨世林，李笑然.紫丁香叶化学成分研究[J].中草药，2009（03）.
[2]李博，朱俊访.丁香叶中所含有效成分的种类及药理作用研究进展[J].黑龙江医药，2009（04）.
[3]王进，王春妍，王保义.丁香叶的药用研究[J].吉林中医药，1992（05）.
[4]张德山.丁香叶的药用研究[J].中医药信息，1984（01）.
[5]李博，朱俊访.丁香叶中所含有效成分的种类及药理作用研究进展[J].黑龙江医药，2009（04）.
[6]张莲秀.丁香叶的研究进展[J].海峡药学，2009（06）.
[7]张军锋，张树军.丁香属植物的化学成分及其药理作用的研究进展[J].海南大学学报（自然科学版），2007（02）.
[8]王录娜，李永吉，管庆霞，王锐.丁香叶的研究现状及展望[J].时珍国医国药，2009（04）.
[9]乔世荣.丁香叶中多糖的含量测定[J].海峡药学，2009（06）.
[10]回瑞華，侯冬岩，李铁纯，刘晓媛，李学成.紫丁香叶挥发性化学成分季节性变化的GC/MS研究[J].质谱学报，2008（01）.
[11]张莲秀.丁香叶的研究进展[J].海峡药学，2009（06）.
[12]张继业，杨范莉，童华.丁香叶的提取工艺研究[J].西北药学杂志，2014（04）.
[13]臧亚茹.丁香及其有效成分药理作用的实验研究[J].承德医学院学报，2007（01）.
[14]李永吉，吕邵娃，王艳宏，安丰堂，刘玠，王艳芝.丁香叶药用研究进展[J].中医药信息，2003（01）.
[15]唐守勇，张芸兰，何芳.均匀设计法优选丁香叶提取工艺[J].中国药业，2009（08）.
【关键词】丁香苦苷；给药途径；研究
丁香叶具有祛风除湿、止痛的功效[1-6]。丁香叶具有抗病毒作用、增强机体的体液免疫功能、抗菌、耐缺氧能力、抗氧化和抗衰老等作用。丁香叶含有酪醇、3，4-二羟基苯乙醇、对羟基肉桂酸和3，4-二羟基苯甲酸、丁香苦苷、黄柏内酷（obaculactone）、芒柄花素（formonoraetin）、丁香酯素 （syrinaresiol）、咲喃甲酸（2-furancarboxylic acid）、D-甘露醇（D_ mannitol）等成分[7-12]。丁香苦苷有较强的利胆作用[13-15]。丁香苦苷对金黄色葡萄球菌、痢疾杆菌、大肠杆菌及绿脓杆菌均有不同程度的抑菌作用。本文对丁香苦苷不同给药途径的药物动力学进行研究。
1.仪器与试药
（1）仪器：AT-830制冷、加热两用色谱柱温箱（杭州瑞析科技有限公司）、KQ2200E超声波清洗器（上海昨非实验室设备有限公司）、瑞士梅特勒-托利多MS精密天平（梅特勒-托利多中国公司）、TΜ-1901 双光束紫外可见分光光度计（北京普析通用仪器有限责任公司）、722s分光光度计（上海精科有限公司）、德国优莱博TW20通用水浴槽（上海沃珑仪器有限公司）、RC-3药物溶出仪（天津大学无线电厂）。甲醇（济南新世纪石化有限公司）、磷酸（深圳三原化工有限公司）、冰醋酸（深圳三原化工有限公司）、四氢呋喃（河南省新乡市中原有机化工有限责任公司）、磷酸二氢钠（河南省新乡市中原有机化工有限责任公司）、乙腈（济南新世纪石化有限公司）。
（2）色谱柱：YMCC18色谱柱（250 mm×4.6mm，5μm）。
（3）对照品：丁香苦苷 购自中国药品生物制品检定所。
（4）试剂：甲醇、乙腈为色谱纯；水为纯化水，其它试剂均为分析纯。
（5）试药：丁香苦苷。
（6）实验动物 新西兰纯种大白兔，雄性。
2.测定方法确定
2.1色谱条件
依据查阅文献及考查的结果，确定色谱条件如下。流动相：水-甲醇-四氢呋喃（62∶34∶4），检测波长：226nm，流速：1.0ml·min-1。柱温：30℃。理论板数按丁香苦苷峰计算应不得低于3000。
2.2对照品溶液的制备
丁香苦苷对照品溶液：精密称取丁香苦苷对照品3mg，置100毫升容量瓶中，加适量甲醇超声溶解，放置室温，用甲醇定容后，取10毫升置于100毫升容量瓶内，用甲醇定容，即得。
2.3给药
家兔禁食过夜，丁香苦苷单体按100毫克每公斤灌胃给予丁香苦苷单体溶液，分别于给药后0.1小时、0.3小时、0.5小时、0.7小时、0.9小时、1.2小时、1.5小时、1.9小时、2.3小时、2.7小时、3.1小时、3.5小时由耳缘静取血0.5毫升，离心分离出血浆。分别按4毫克每公斤、8毫克每公斤、12毫克每公斤g、16毫克每公斤、20毫克每公斤的剂量给家兔耳缘静脉注射给予丁香苦苷单体溶液，分别于给药后0.1小时、0.3小时、0.5小时、0.7小时、0.9小时、1.2小时、1.5小时、1.7小时由耳缘静取血0.5毫升，离心分离出血浆。
2.4供试品溶液的制备
精密吸取0.4毫升血浆，加人2毫升甲醇，高速离心20分钟，吸取上清液0.2毫升，过滤，既得。
2.5专属性试验
取空白血样，制备制成阴性液，依上述方法测定，结果阴性试验没有干扰，表明本方法专属性良好。
2.6精密度试验
照上述色谱条件，精密吸取丁香苦苷对照品溶液10μl，连续进样6次，记录峰面积。结果，RSD=0.66%，表明本方法精密度良好。
2.7对照品的线性考察
精密称取丁香苦苷对照品3.0mg，置100ml容量瓶中，加入甲醇使溶解并稀释至刻度，摇匀，分别精密吸取0.1、0.2、0.4、0.8、1.6、3.2、6.4mL，置于10mL量瓶中，加空白血浆至刻度，摇匀。分别精密上述溶液吸取10μL，注人液相色谱仪，依照2.1项下的色谱条件测定，记录色谱峰。以峰面积（Y）为纵坐标，对照品进样量（X）为横坐标，绘制标准曲线，计算回归方程。结果表明，丁香苦苷在0.3～19.2μg·mL-1范围内呈良好的线性关系。
2.8重现性试验
称取同一批的丁香苦苷样品6份，按测定方法项下的方法制备供试品溶液，测定含量，并计算样品的RSD值，结果RSD为0.62%，结果表明此方法的重现性良好。
2.9准确度试验
取空白血浆及对照品溶液，制备丁香苦苷低、中、高三浓度的标准血浆样品，代入线性方程计算浓度，以测得值与加入值的比值，计算回收率，平均回收率分别为96.32%，RSD为0.89%。
3.讨论
分别考察水-甲醇-磷酸（50：50：0.01），水-甲醇-冰醋酸（90∶30∶0.12），水-甲醇-四氢呋喃（62∶34∶4），0.1mol/L磷酸二氢钠：乙腈（90∶10）（用磷酸调节pH值至3.0）， 甲醇-乙腈-冰醋酸（60∶40：0.1）不同比例的流动相，结果以甲醇-乙腈-水 （10：15：75）为流动相，供试品各峰分离效果最好，故选用水-甲醇-四氢呋喃（62∶34∶4）为流动相。家兔口服丁香苦苷单体后吸收和消除均较快，消除半衰期为0.5小时.家兔静脉注射丁香苦苷单体在体内吸收快，AUC随剂量的增加而成比例的增加，静脉给药的绝对生物利用度为35.1%。 [科]
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[6]张莲秀.丁香叶的研究进展[J].海峡药学，2009（06）.
[7]张军锋，张树军.丁香属植物的化学成分及其药理作用的研究进展[J].海南大学学报（自然科学版），2007（02）.
[8]王录娜，李永吉，管庆霞，王锐.丁香叶的研究现状及展望[J].时珍国医国药，2009（04）.
[9]乔世荣.丁香叶中多糖的含量测定[J].海峡药学，2009（06）.
[10]回瑞華，侯冬岩，李铁纯，刘晓媛，李学成.紫丁香叶挥发性化学成分季节性变化的GC/MS研究[J].质谱学报，2008（01）.
[11]张莲秀.丁香叶的研究进展[J].海峡药学，2009（06）.
[12]张继业，杨范莉，童华.丁香叶的提取工艺研究[J].西北药学杂志，2014（04）.
[13]臧亚茹.丁香及其有效成分药理作用的实验研究[J].承德医学院学报，2007（01）.
[14]李永吉，吕邵娃，王艳宏，安丰堂，刘玠，王艳芝.丁香叶药用研究进展[J].中医药信息，2003（01）.
[15]唐守勇，张芸兰，何芳.均匀设计法优选丁香叶提取工艺[J].中国药业，2009（08）.