【摘 要】
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目的 观察罗格列酮对体外培养的人眼球筋膜囊成纤维细胞(HTFs)增殖及转化生长因子β1(TGF-β1)分泌的影响.方法 对照实验研究.体外培养HTFs,分别采用四甲基偶氮唑蓝微量酶反
【机 构】
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汕头市巾心医院,中山大学中山眼科中心
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目的 观察罗格列酮对体外培养的人眼球筋膜囊成纤维细胞(HTFs)增殖及转化生长因子β1(TGF-β1)分泌的影响.方法 对照实验研究.体外培养HTFs,分别采用四甲基偶氮唑蓝微量酶反应比色(MTT)法及划线法,对培养细胞分别加入10、20、50、100、250、300、400及500 ms/L的罗格列酮,研究不同浓度的罗格列酮对体外培养的HTFs增殖及移行的影响,同时采用酶联免疫吸附测定(ELISA)检测不同浓度的罗格列酮对细胞TGF-β1分泌量的影响,采用半定量逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)法,研究不同浓度罗格列酮对TGF-β1 mRNA表达的影响.不同浓度罗格列酮对HTFs增殖活力、TGF-β1分泌及TGF-β1 mRNA合成的影响,采用单因素方差分析(ANOVA);不同浓度罗格列酬对细胞移行数量的影响,采用单因素多水平设计定量资料的方差分析;相邻药物浓度组间吸光度(A)值和细胞移行数量比较,采用q检验.结果 当罗格列酮浓度为20 ms/L时,MTT法测定的A值为0.29±0.02,ELISA法测定的A值为267.48±20.31,RT-PCR测定的A值为0.55±0.02,与对照组(MTT法测定的A值为0.33±0.01,ELISA法测定的A值为323.48±13.69,RT-PCR法测定的A值为0.69±O.02)相比,能明显抑制HTFs的增殖和移行,并明显下调TGF-β1的分泌和TGF-β1mRNA的表达,差异有统计学意义(F=178.293,86.404,176.102;P＜0.01);随着罗格列酮浓度的增高,抑制作用相应增强,相邻药物浓度间A值差异均有统计学意义(q值介于3.00～10.36之间,P＜0.05).结论 罗格列酮能明显抑制HTFs增殖和移行,其作用与其抑制TGF-β1的分泌有关.
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