【摘 要】
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目的:通过分子克隆构建KPNA2过表达载体,探究其对骨肉瘤细胞143B生长的影响.方法:利用Trizol法提取Hela细胞总RNA,而后通过PCR反应扩增KPNA2基因,将扩增产物克隆至表达载体pc
【机 构】
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中国人民解放军联勤保障部队第940 医院创伤骨科,甘肃 兰州,730050
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目的:通过分子克隆构建KPNA2过表达载体,探究其对骨肉瘤细胞143B生长的影响.方法:利用Trizol法提取Hela细胞总RNA,而后通过PCR反应扩增KPNA2基因,将扩增产物克隆至表达载体pcD-NA3.1+构建KPNA2过表达质粒.通过qPCR实验和Western blot实验检测KPNA2过表达载体转染143B细胞后的表达效率.利用CCK-8、平板克隆形成实验检测143B细胞的增殖状况,利用流式细胞术检测143B细胞的周期分布.结果:qPCR实验和Western blot实验均表明KPNA2过表达质粒转染后,143B细胞内KP-NA2表达水平显著上调.CCK-8、平板克隆形成实验结果证实KPNA2上调能够促进143B细胞增殖.流式细胞术结果表明过表达KPNA2能够加快143B细胞周期进程.结论:KPNA2能够促进骨肉瘤细胞系143B生长,为骨肉瘤早期诊断和靶向治疗提供实验依据和理论基础.
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