观察亚砷酸钠慢性饮水染毒诱导大鼠肝纤维化的蛋白组学改变。
方法将40只健康8周龄无特定病原体（specefic pathogen free，SPF ）Sprague-Dawley (SD）雄性大鼠按体质量采用随机数字表法分为4组，每组10只，分别为对照组（饮用去离子水）及低、中、高剂量染砷组（饮用0.68、1.36、2.73 mg/kg亚砷酸钠溶液）。自由饮水24周时，采集大鼠血样，取肝脏。采用酶联免疫分析（ELISA）法检测肝纤维化指标：血清透明质酸（HA）、Ⅲ型前胶原（PCⅢ）、Ⅳ型胶原（Ⅳ-C）、层粘连蛋白（LN）。基于相对和绝对定量同位素标记（isobaric tags for relative and absolute quantitation, iTRAQ）的8标实验，结合二维液相色谱串联质谱（2DLC-MS/MS），检测对照组和中、高剂量染砷组大鼠肝脏组织差异蛋白表达。
结果对照组，低、中、高剂量染砷组血清HA分别为（198.51 ± 16.64）、（218.39 ± 34.98）、（261.72 ± 30.56）、（297.31 ± 35.72）ng/L，PCⅢ分别为（15.32 ± 2.15）、（16.78 ± 2.64）、（19.51 ± 0.85）、（21.42 ± 1.63）μg/L，LN分别为（734.57 ± 86.00）、（792.65 ± 94.15）、（916.83 ± 84.40）、（1 008.09 ± 64.17）μg/L，Ⅳ-C分别为（52.34 ± 14.65）、（59.72 ± 12.84）、（74.38 ± 4.83）、（78.46 ± 4.30）μg/L，组间比较差异均有统计学意义（F= 21.136、19.957、22.007、14.288，P均< 0.05）。其中，中、高剂量染砷组上述指标均高于对照组和低剂量染砷组（P均< 0.05），且高剂量染砷组血清HA、PCⅢ、LN高于中剂量染砷组（P均< 0.05）。iTRAQ技术结合2DLC-MS/MS技术选取蛋白质的置信阈值（unused protScore）> 1.3，且至少有1条匹配肽段在95％置信区间内作为蛋白质鉴定结果，鉴定出2 948种蛋白质。文氏图比较发现对照组和中、高剂量染砷组均检测到2 162种蛋白，除去对照组中有意义的差异蛋白，中剂量染砷组上调蛋白为687种，下调为548种；高剂量染砷组上调为633种，下调为519种。中、高剂量染砷组表达差异蛋白数量比较，差异无统计学意义（P> 0.05）。与甲基代谢相关的差异蛋白砷甲基转移酶（AS3MT）、蛋氨酸腺苷转移酶（MAT）、丝氨酸羟甲基转移酶（SHMT）、甜菜碱同型半胱氨酸甲基转移酶（BHMT ），线粒体内胆碱脱氢酶（CHDH）、胱硫醚酶（CTH）、半胱氨酸脱羧酶（CSAD），在中、高剂量染砷组均上调；甲硫氨酸合成酶（MTR）有2种蛋白，其中METK1上调，F1LRB8下调。与谷胱甘肽（GSH）相关蛋白18种，包括Gsta1、Gsta4、Gsta5、Gstt1、Gstt2、Gstk1、Gstp1、Gstm1、Gstm2、Gstm3，Gss、Gpx1、Gpx4、Esd、Hagh、Glo1、Mgst1、B6DYQ5，表达均上调；与肝纤维化有关的蛋白有Hic-5、谷氨酰胺合成酶（GSS）、原肌球蛋白（Tpm），其中Tpm有6种，包括Tpm1三种、Tpm2两种、Tpm3一种，表达均上调。
结论慢性砷暴露后导致肝脏纤维化改变，肝纤维化大鼠AS3MT、MTR、MAT、SHMT、BHMT、CHDH、CTH、CSAD、Hic-5、GSH、GSS、Tpm高表达，可能在砷代谢和肝纤维化中发挥重要作用，与肝纤维化的发生相关。