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摘要：单基因遗传病的治疗措施主要有：宫内治疗、替代疗法、药物防治、手术疗法和器官移植、代谢疗法、饮食疗法等；MLPA的应用不依赖患者信息，可有效对DMD/BMD、SMA致病基因拷贝数进行相对定量，检出遗传缺陷携带者和提高患者诊断率；HRM分析方法可对临床β-地中海贫血突变进行快速的分型和突变扫描检测；同时开展临床试验可为最终安全、有效应用于临床患者奠定基础。
关键词：单基因遗传病；防控；治疗措施
中图分类号：R596.2 文献标识码：A 文章编号：1671-864X（2016）07-0171-01
一、单基因遗传病的防控与治疗分析
单基因遗传病是遗传病中的主要类型，由一对等位基因或一对同源染色体上单个基因突变引起，主要分为常染色体显性遗传病、常染色体隐性遗传病、X连锁显性遗传病、X连锁隐性遗传病、Y连锁遗传病。单基因遗传病的防控措施主要有：加强遗传病知识的宣传，远离外界环境诱变因素，开展遗传咨询，婚姻指导，婚前检查，产前诊断，遗传病症状出现前的预防等。单基因遗传病的治疗措施主要有：宫内治疗、替代疗法、药物防治、手术疗法和器官移植、代谢疗法、饮食疗法等。
二、MLPA技术在单基因遗传病DMD/BMD、SMA基因诊断中的应用
更多还原 ①MLPA检测到5位患者已知位点及其相邻位点存在缺失突变。说明MLPA检测范围广，结果准确可靠。②18位DMD患者进行了缺失热区21个外显子的检测，诊断率为66.7%（12/18），应用MLPA技术后，在3个未筛查到缺失突变的DMD家系中发现了重复突变，DMD患者诊断率提高到83.3%（15/18）。联合应用MLPA检测、缺失热区突变筛查和遗传连锁分析可为18个有患者参与诊断的DMD家系提供信息，诊断率达100%（18/18）。③连锁分析需在有患者参与的前提下才能进行携带者的筛查，而MLPA不依赖患者参与，即可对疑似携带者的致病基因行直接诊断。本研究应用MLPA筛查到11位DMD女性携带者（其中5位来自无患者信息的家系），结果经实时荧光定量PCR验证无误。携带者诊断率为50%（11/22）。④一例产前诊断胎儿SRY检测为阴性，其未遗传到母亲的缺陷基因，排除携带者身份。⑤5个家系（家系6-10）经遗传连锁分析提示，患者X致病染色体均遗传自其母亲。应用MLPA发现这5个家系DMD患者母亲基因型正常，推知患者的缺失突变系新发生突变，突变新发生率为35.7%（5/14）。仅依靠连锁分析筛查携带者有可能发生误诊，故生育指导时，仍需对疑似携带者行直接基因诊断。SMA：①4位SMA患者MLPA检测结果：1号患者SMN1纯合缺失；2号患者一拷贝SMN1缺失，另一拷贝转变为SMN2；3、4号患者基因型均表现为一拷贝SMN1装变为SMN2，另一拷贝仅7号外显子转变为SMN2外显子7。MLPA可判断SMN1是发生了缺失还是转换，检测结果比PCR-酶切法更详细。②PCR-酶切法不能筛查携带者，MLPA对12位SMA疑似携带者的SMN1/2基因拷贝数进行了相对定量，确定了携带者身份，为其再生育提供了有利信息，携带者诊断率为100%（12/12）。③本课题发现了8种SMN基因型。结论MLPA是一种高效、灵敏、准确、性价比较高的DMD/BMD、SMA分子诊断新方法。MLPA的应用不依赖患者信息，可有效对DMD/BMD、SMA致病基因拷贝数进行相对定量，检出遗传缺陷携带者和提高患者诊断率。
三、HRM分析检测单基因遗传病点突变及β-地中海贫血的临床检测
妊娠虽然可使HbA2的水平稍微升高，但是并未影响到HbA2对β-地中海贫血携带者的筛查作用，不论在孕妇还是非孕妇中，HbA2均有很好的筛查β-地中海贫血携带者的价值。第二章应用HRM分析检测β-地中海贫血基因点突变目的应用上述建立的HRM分析方法对未知基因型的标本进行β-珠蛋白基因检测，探讨其临床应用的可行性。方法1.应用上述第一部分优化的条件方法对未知基因型的标本进行检测。2.选取60个标本，其中包含5个血液学和HbA2确认的β-地中海贫血携带但是RDB方法没发现异常的标本，先进行HRM分析检测再进行RDB或β-珠蛋白序列测序检测进行结果比较。3.进行HRM分析检测时加入中国最常见的β？地中海贫血杂合突变基因型标本作阳性对照及正常野生型标本作为阴性对照。结果P1+P2引物的反应产物中，有一个标本通过与RDB和测序检测结果相比较发现为假阳性。其它检测出存在突变的标本的曲线均与阳性对照分型一致。5个外送的血液学提示β-地中海贫血携带的标本中均在扫描时发现有异常曲线，经测序检测确认为一个Hb G-Coushatta即HBB：c.68A>C、一个Cd37 （TGG>TAG）即HBB：c.113G>A、一个Hb L’Aquila即HBB：c.319C>G和两个Hb New York即HBB：c.341T>A杂合突变，其余结果与RDB方法或测序方法确定的基因型一致。结论HRM分析方法可对临床β-地中海贫血突变进行快速的分型和突变扫描检测。
四、遗传病的生物治疗
随着生命与医学科学的发展，近年来以靶向致病分子或其相关信号通路、靶分子的外源物质补充、转基因、RNA干扰、基因组编辑等生物学技术为代表的生物学治疗措施开始应用于遗传病的治疗，并取得了一定的疗效。但目前大多数遗传病的生物学治疗仍局限于动物实验研究，今后在继续研发基于致病机制的新治疗策略的同时，将关注如何开展临床试验，为最终安全、有效应用于临床患者奠定基础。
参考文献：
[1]刘振兴1，2，崔亚洲1，刘超1，2，栾静1，周小艳1，韩金祥1. 成纤维细胞生长因子受体基因野生型和 E731K突变型真核表达质粒的构建及鉴定[J]. 中国生物制品学杂志. 2014（05）
[2]李，袁，许烨烨，方慧琴，丛 *. Ⅳ型成骨发育不全家系的遗传分析[J]. 现代妇产科进展. 2015（03）
[3]邹新博，梅栩彬，赵立民，刘文君. 阻塞性睡眠呼吸暂停综合征合并马凡氏综合征1例[J]. 山东大学耳鼻喉眼学报. 2015（05）
关键词：单基因遗传病；防控；治疗措施
中图分类号：R596.2 文献标识码：A 文章编号：1671-864X（2016）07-0171-01
一、单基因遗传病的防控与治疗分析
单基因遗传病是遗传病中的主要类型，由一对等位基因或一对同源染色体上单个基因突变引起，主要分为常染色体显性遗传病、常染色体隐性遗传病、X连锁显性遗传病、X连锁隐性遗传病、Y连锁遗传病。单基因遗传病的防控措施主要有：加强遗传病知识的宣传，远离外界环境诱变因素，开展遗传咨询，婚姻指导，婚前检查，产前诊断，遗传病症状出现前的预防等。单基因遗传病的治疗措施主要有：宫内治疗、替代疗法、药物防治、手术疗法和器官移植、代谢疗法、饮食疗法等。
二、MLPA技术在单基因遗传病DMD/BMD、SMA基因诊断中的应用
更多还原 ①MLPA检测到5位患者已知位点及其相邻位点存在缺失突变。说明MLPA检测范围广，结果准确可靠。②18位DMD患者进行了缺失热区21个外显子的检测，诊断率为66.7%（12/18），应用MLPA技术后，在3个未筛查到缺失突变的DMD家系中发现了重复突变，DMD患者诊断率提高到83.3%（15/18）。联合应用MLPA检测、缺失热区突变筛查和遗传连锁分析可为18个有患者参与诊断的DMD家系提供信息，诊断率达100%（18/18）。③连锁分析需在有患者参与的前提下才能进行携带者的筛查，而MLPA不依赖患者参与，即可对疑似携带者的致病基因行直接诊断。本研究应用MLPA筛查到11位DMD女性携带者（其中5位来自无患者信息的家系），结果经实时荧光定量PCR验证无误。携带者诊断率为50%（11/22）。④一例产前诊断胎儿SRY检测为阴性，其未遗传到母亲的缺陷基因，排除携带者身份。⑤5个家系（家系6-10）经遗传连锁分析提示，患者X致病染色体均遗传自其母亲。应用MLPA发现这5个家系DMD患者母亲基因型正常，推知患者的缺失突变系新发生突变，突变新发生率为35.7%（5/14）。仅依靠连锁分析筛查携带者有可能发生误诊，故生育指导时，仍需对疑似携带者行直接基因诊断。SMA：①4位SMA患者MLPA检测结果：1号患者SMN1纯合缺失；2号患者一拷贝SMN1缺失，另一拷贝转变为SMN2；3、4号患者基因型均表现为一拷贝SMN1装变为SMN2，另一拷贝仅7号外显子转变为SMN2外显子7。MLPA可判断SMN1是发生了缺失还是转换，检测结果比PCR-酶切法更详细。②PCR-酶切法不能筛查携带者，MLPA对12位SMA疑似携带者的SMN1/2基因拷贝数进行了相对定量，确定了携带者身份，为其再生育提供了有利信息，携带者诊断率为100%（12/12）。③本课题发现了8种SMN基因型。结论MLPA是一种高效、灵敏、准确、性价比较高的DMD/BMD、SMA分子诊断新方法。MLPA的应用不依赖患者信息，可有效对DMD/BMD、SMA致病基因拷贝数进行相对定量，检出遗传缺陷携带者和提高患者诊断率。
三、HRM分析检测单基因遗传病点突变及β-地中海贫血的临床检测
妊娠虽然可使HbA2的水平稍微升高，但是并未影响到HbA2对β-地中海贫血携带者的筛查作用，不论在孕妇还是非孕妇中，HbA2均有很好的筛查β-地中海贫血携带者的价值。第二章应用HRM分析检测β-地中海贫血基因点突变目的应用上述建立的HRM分析方法对未知基因型的标本进行β-珠蛋白基因检测，探讨其临床应用的可行性。方法1.应用上述第一部分优化的条件方法对未知基因型的标本进行检测。2.选取60个标本，其中包含5个血液学和HbA2确认的β-地中海贫血携带但是RDB方法没发现异常的标本，先进行HRM分析检测再进行RDB或β-珠蛋白序列测序检测进行结果比较。3.进行HRM分析检测时加入中国最常见的β？地中海贫血杂合突变基因型标本作阳性对照及正常野生型标本作为阴性对照。结果P1+P2引物的反应产物中，有一个标本通过与RDB和测序检测结果相比较发现为假阳性。其它检测出存在突变的标本的曲线均与阳性对照分型一致。5个外送的血液学提示β-地中海贫血携带的标本中均在扫描时发现有异常曲线，经测序检测确认为一个Hb G-Coushatta即HBB：c.68A>C、一个Cd37 （TGG>TAG）即HBB：c.113G>A、一个Hb L’Aquila即HBB：c.319C>G和两个Hb New York即HBB：c.341T>A杂合突变，其余结果与RDB方法或测序方法确定的基因型一致。结论HRM分析方法可对临床β-地中海贫血突变进行快速的分型和突变扫描检测。
四、遗传病的生物治疗
随着生命与医学科学的发展，近年来以靶向致病分子或其相关信号通路、靶分子的外源物质补充、转基因、RNA干扰、基因组编辑等生物学技术为代表的生物学治疗措施开始应用于遗传病的治疗，并取得了一定的疗效。但目前大多数遗传病的生物学治疗仍局限于动物实验研究，今后在继续研发基于致病机制的新治疗策略的同时，将关注如何开展临床试验，为最终安全、有效应用于临床患者奠定基础。
参考文献：
[1]刘振兴1，2，崔亚洲1，刘超1，2，栾静1，周小艳1，韩金祥1. 成纤维细胞生长因子受体基因野生型和 E731K突变型真核表达质粒的构建及鉴定[J]. 中国生物制品学杂志. 2014（05）
[2]李，袁，许烨烨，方慧琴，丛 *. Ⅳ型成骨发育不全家系的遗传分析[J]. 现代妇产科进展. 2015（03）
[3]邹新博，梅栩彬，赵立民，刘文君. 阻塞性睡眠呼吸暂停综合征合并马凡氏综合征1例[J]. 山东大学耳鼻喉眼学报. 2015（05）