【摘 要】
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目的模拟增生性瘢痕形成和演变过程中的环境因素，探讨中、重度低氧低血清蛋白对人增生性瘢痕Fb(HSF)功能的影响。方法常规培养人HSF，取第3～6代细胞按照随机数字表法分为10.0%氧气＋10.0%小牛血清(FCS)、5.0%氧气＋5.0%FCS、0.5%氧气＋0.5%FCS组，先用不含FCS的DMEM培养液培养24 h后，再采用相应体积分数的氧气和FCS培养。采用噻唑蓝法检测细胞增殖活性(结果以实
【机 构】
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200025 上海交通大学医学院附属瑞金医院上海市烧伤研究所，上海市创面修复研究中心,200025 上海交通大学医学院附属瑞金医院上海市烧伤研究所，上海市创面修复研究中心,200025 上海交通大学医
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目的模拟增生性瘢痕形成和演变过程中的环境因素，探讨中、重度低氧低血清蛋白对人增生性瘢痕Fb(HSF)功能的影响。
方法常规培养人HSF，取第3～6代细胞按照随机数字表法分为10.0%氧气＋10.0%小牛血清(FCS)、5.0%氧气＋5.0%FCS、0.5%氧气＋0.5%FCS组，先用不含FCS的DMEM培养液培养24 h后，再采用相应体积分数的氧气和FCS培养。采用噻唑蓝法检测细胞增殖活性(结果以实际细胞数表示)，天狼星红染色法检测细胞总胶原含量(结果以吸光度值表示)，蛋白质印迹法检测低氧诱导因子1α(HIF-1α)、血管内皮生长因子(VEGF)、TGF-β1、B淋巴细胞瘤2(Bcl-2)、P53的蛋白表达(结果以灰度值比值表示)，原位末端标记法检测细胞凋亡率。以上实验每组样本数均为3。对数据行Kruskal-Wallis检验、Dunnett检验。
结果(1)与10.0%氧气＋10.0%FCS组的(11 000±1 306)个比较，5.0%氧气＋5.0%FCS组细胞增殖活性较高[(13 290±1 500)个，P<0.05]，0.5%氧气＋0.5%FCS组细胞增殖活性较低[(6 999±765)个，P<0.05]。(2)与10.0%氧气＋10.0%FCS组(0.039 6±0.004 2)比较，5.0%氧气＋5.0%FCS组细胞总胶原含量较高(0.051 6±0.005 1, P<0.05)，0.5%氧气＋0.5%FCS组细胞总胶原含量较低(0.015 6±0.002 4，P<0.05)。(3)与10.0%氧气＋10.0%FCS组比较，5.0%氧气＋5.0%FCS组细胞的HIF-1α、VEGF、TGF-β1、Bcl-2蛋白表达量增高(P值均小于0.05)，P53的蛋白表达量差异不明显(P>0.05)；0.5%氧气＋0.5%FCS组细胞的HIF-1α、VEGF、TGF-β1、Bcl-2蛋白表达量下降(P值均小于0.05)，P53蛋白表达量增高(P<0.05)。(4)与10.0%氧气＋10.0%FCS组[(1.2±0.9)%]比较，5.0%氧气＋5.0%FCS组细胞凋亡率无明显差异[(2.6±0.9)%，P>0.05]，0.5%氧气＋0.5%FCS组细胞凋亡率明显升高[(13.3±4.1)%，P<0.05]。
结论重度低氧低血清蛋白可抑制人HSF的增殖活性、总胶原生成，并诱导细胞凋亡。
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