大鼠抗组胺药敏感性细胞色素P450基因的克隆及其反转录病毒载体的构建和鉴定

来源 :中国组织工程研究与临床康复 | 被引量 : 0次 | 上传用户:a6532460
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构建反转录病毒表达载体pLXSN—HP450。方法:实验于2004—12/2006—05在广西医科大学生化药理实验室完成。提取正常的Wistar大鼠肝组织的总RNA,反转录一聚合酶链反应技术扩增出抗组胺药敏感性细胞色素P450(HP450)基因。并克隆到pMD18-T载体,经蓝白斑筛选后进行聚合酶链反应,酶切,测序鉴定。BamHI,EcoRI双酶切构建好的重组质粒和反转录病毒载体pLXSN在16℃下经T4连接酶连接过夜,并转化到感受态细胞DH5α,以菌液为模板做聚合酶链反应,结合酶切筛选及鉴定阳性重组反转
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