探讨葡萄糖调节蛋白78(GRP78）基因在卵巢上皮性癌（卵巢癌）细胞自噬与凋亡中的作用及其机制，明确其对卵巢癌细胞生长及顺铂敏感性的影响。
方法以钙选择性螯合剂––BAPTA-AM、钙离子载体––A23187分别下调、上调卵巢癌细胞系SKOV3细胞中GRP78基因的表达，实验分为3组，BAPTA-AM组：加入BAPTA-AM，终浓度为40 μmol/L，作用时间为1 h; A23187组：加入A23187，终浓度为4 μmol/L，作用时间为24 h；空白对照组：未加任何药物，作用24 h。（1）采用逆转录（RT）-PCR技术、蛋白印迹（western blot）法分别检测3组细胞中GRP78、beclin1、Bcl-2、CHOP mRNA和蛋白的表达；（2）荧光染色法检测3组细胞的自噬情况；（3）流式细胞仪检测3组细胞的凋亡情况；（4） 3组细胞经不同浓度（100、50、25、12.5、6.25、3.12、1.56、0.78 mg/L）顺铂作用后（即为BAPTA-AM＋顺铂组、A23187+顺铂组、顺铂组），采用四甲基偶氮唑蓝（MTT）比色法测定3组细胞对顺铂的敏感性[以50％抑制浓度（IC50）表示]。
结果（1) 3组SKOV3细胞中GRP78、beclin1、Bcl-2、CHOP mRNA和蛋白表达的比较：SKOV3细胞中GRP78、beclin1、Bcl-2、CHOP mRNA表达水平，BAPTA-AM组分别为0.583±0.025、0.860±0.055、0.714±0.032、0.811±0.004，A23187组分别为0.840±0.044、0.654±0.065、0.908±0.047、0.620±0.062，空白对照组分别为0.687±0.032、0.772±0.029、0.845±0.018、0.712±0.077；SKOV3细胞中GRP78、beclin1、Bcl-2、CHOP蛋白表达水平，BAPTA-AM组分别为0.423±0.035、0.952±0.022、0.385±0.032、0.681±0.095，A23187组分别为0.743±0.032、0.638±0.025、0.596±0.029、0.431±0.095，空白对照组分别为0.617±0.031、0.789±0.083、0.492±0.036、0.531±0.003。SKOV3细胞中beclin1、CHOP mRNA和蛋白表达水平，BAPTA-AM组明显高于空白对照组（P<0.05），A23187组明显低于空白对照组（P<0.05）；SKOV3细胞中GRP78、Bcl-2 mRNA和蛋白表达水平，BAPTA-AM组明显低于空白对照组（P<0.05），A23187组明显高于空白对照组（P<0.05）。（2) 3组SKOV3细胞自噬情况的比较：BAPTA-AM组、A23187组、空白对照组细胞的荧光强度分别为706±117、473±128、595±126，BAPTA-AM组、A23187组分别与空白对照组比较，差异均有统计学意义（P<0.05）。（3) 3组SKOV3细胞凋亡率的比较：BAPTA-AM组细胞凋亡率为（27.4±2.2）%，明显高于空白对照组[（19.6±1.4）%，P< 0.05]；A23187组细胞凋亡率为（12.2±1.9）%，明显低于空白对照组（P<0.05）。（4) 3组SKOV3细胞对顺铂敏感性的比较：BAPTA-AM+顺铂组、A23187+顺铂组、顺铂组细胞对顺铂的IC50分别为（2.00±0.17）、（4.91±2.52）、（3.02±0.62）mg/L，BAPTA-AM＋顺铂组、A23187＋顺铂组分别与顺铂组比较，差异均有统计学意义（P<0.05）；BAPTA-AM+顺铂组对顺铂的敏感性增加了33.8%，A23187+顺铂组对顺铂的敏感性降低了62.6%。
结论GRP78通过调节beclin1、Bcl-2、CHOP表达而影响卵巢癌SKOV3细胞的自噬与细胞凋亡，进而影响卵巢癌细胞对顺铂的敏感性，提示GRP78可能成为卵巢癌治疗及提高卵巢癌顺铂敏感性的新靶点。