本研究旨在克隆绵羊(Ovis aires)视黄醇结合蛋白4(retinol binding protein 4,RBP4)基因的CDS区序列,检测其在绵羊不同月龄睾丸组织中的表达水平,从而为研究RBP4基因在绵羊睾丸发育中的作用奠定基础。以绵羊睾丸为材料,采用RT-PCR技术克隆RBP4基因并用相关生物信息学软件预测RBP4蛋白的结构,采用qRT-PCR和免疫组织化学技术分别检测RBP4 m RNA和蛋白质的表达水平。结果显示,克隆得到绵羊RBP4基因CDS区长度为606 bp,编码201个氨基酸。绵羊RBP4核苷酸序列与山羊(Capra hircus)、牛(Bos taurus)、猪(Sus scrofa)、人(Homo sapiens)和小鼠(Mus musculus)的相似性分别为97%、97%、95%、91%和85%。绵羊RBP4基因与山羊具有最近的亲缘关系,其次为牛、猪、人和小鼠。RBP4 m RNA在不同月龄绵羊睾丸中均有表达,表达量随月龄增加呈现出先降低后上升的趋势,相邻两组之间差异极显著(P<0.01)。RBP4蛋白主要表达于初级精母细胞、精子细胞、精子和生精小管,阳性反应积分光密度值随月龄增加呈现出先升高后降低的趋势,与绵羊睾丸RBP4 m RNA表达量相反。本研究结果表明,RBP4基因可能参与绵羊睾丸发育的调控,为进一步探讨RBP4在绵羊生殖过程中发挥的作用提供参考资料。