【摘 要】
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构建了还原型辅酶Ⅰ (NADH)再生与亮氨酸脱氢酶(LDH)偶联的催化体系,合成甲酸脱氢酶(FDH)基因序列片段,连接入pET28a质粒,构建了pFDH-pET28a,转化入Ecoli BL21 (DE3)表达.经I
【机 构】
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河南师范大学化学化工学院,河南新乡453007中国医药工业研究总院上海医药工业研究院,创新药物与制药工艺国家重点实验室,上海200040;河南师范大学化学化工学院,河南新乡,453007;雅本化学股份
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构建了还原型辅酶Ⅰ (NADH)再生与亮氨酸脱氢酶(LDH)偶联的催化体系,合成甲酸脱氢酶(FDH)基因序列片段,连接入pET28a质粒,构建了pFDH-pET28a,转化入Ecoli BL21 (DE3)表达.经IPTG诱导后,FDH粗酶液的酶活力约10u/ml.合成LDH基因序列,连接入pET21a质粒,构建了pLDH-pET21a,将该质粒与pFDH-pET28a共转化入E.coli BL21 (DE3),共表达FDH与LDH,与苏氨酸脱氨酶(TD)共同催化L-2-氨基丁酸的合成.投料量为7 g/100 ml时,该体系产率可达95％.
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