【摘 要】
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目的通过纳米抗体CDR3区展示β-HCGC端表位的方式,验证纳米抗体在抗原表位展示中的作用。方法采用基因合成的方法,将β-HCGC端表位(氨基序列151~165)插入到纳米抗体CDR3区,酶
【机 构】
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沧州医学高等专科学校病原生物与免疫学教研室,沧州医学高等专科学校科技实验中心,沧州市纳米抗体技术创新中心
【基金项目】
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国家自然科学基金资助项目(11672332,81772018),天津市自然科学基金(17JCZDJC35400),沧州市科学技术研究与发展指导计划(162302146,162302158).
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目的通过纳米抗体CDR3区展示β-HCGC端表位的方式,验证纳米抗体在抗原表位展示中的作用。方法采用基因合成的方法,将β-HCGC端表位(氨基序列151~165)插入到纳米抗体CDR3区,酶切、连接原核表达载体pET24a,IPTG诱导表达。将His标签填料纯化得到的高纯度目的蛋白免疫新西兰大耳白兔,经5次免疫后,间接ELISA检测效价,抗原偶联纯化介质进行免疫多抗纯化,Western blot进行多抗特异性检测。结果成功构建原核表达重组载体,并获得高表达菌株,IPTG诱导后,目的蛋白主要以包涵体的形式存
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