高温胁迫下香葱AfDanJ基因克隆、表达与亚细胞定位分析

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热激蛋白广泛参与了作物高温胁迫响应,DanJ基因属于热激蛋白家族成员。为了探究香葱AfDanJ基因对高温胁迫的表达和定位,本研究利用5’RACE和3’RACE方法从香葱中扩增获得AfDanJ基因全长cDNA,并对该基因序列的理化性质和表达模式进行分析。结果表明,AfDanJ基因cDNA具有1 257 bp的完整开放阅读框,预测与DNJH2 ALLPO家族成员具有高度相似性,预测编码蛋白长度为418 aa,等电点为6.10,是稳定蛋白。进化树分析表明,香葱AfDanJ与芦笋dnaJ protein homolog亲缘关系最近。亚细胞定位显示AfDanJ定位于细胞核、细胞膜和叶绿体中。此外,在耐热香葱AF60中,AfDnaJ的表达量在高温胁迫24 h、48 h、72 h后比0 h分别增加了1.9倍、1.9倍和3.1倍,推测该基因参与香葱高温胁迫逆境响应。本研究为解析该基因对香葱耐热性的生物学功能提供一定的参考。
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