【摘 要】
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目的 探讨Runt相关转录因子3(runt related transcription factor 3,Runx3)在心肌梗死(myocardial infarction,MI)后心脏成纤维细胞分化、Ⅰ型胶原(collagen Ⅰ,Col Ⅰ)合成和增殖中的作用.方法 选择C57BL/6J雄性小鼠为研究对象.分为模型组(MI)和假手术组(Sham),MI组采用结扎左冠状动脉建立MI模型,分别在建模后7、14、28 d处死小鼠;Sham组不结扎左冠状动脉.另将Sham组和MI组小鼠建模前尾静脉分别注射Ru
【机 构】
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430015武汉,江汉大学附属医院心血管内科
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目的 探讨Runt相关转录因子3(runt related transcription factor 3,Runx3)在心肌梗死(myocardial infarction,MI)后心脏成纤维细胞分化、Ⅰ型胶原(collagen Ⅰ,Col Ⅰ)合成和增殖中的作用.方法 选择C57BL/6J雄性小鼠为研究对象.分为模型组(MI)和假手术组(Sham),MI组采用结扎左冠状动脉建立MI模型,分别在建模后7、14、28 d处死小鼠;Sham组不结扎左冠状动脉.另将Sham组和MI组小鼠建模前尾静脉分别注射Runx3小干扰RNA(si-Runx3)或阴性对照siRNA(si-NC),建模后28 d处死,分为Sham+si-NC组、Sham+si-Runx3组、MI 28 d+si-NC组和MI 28 d+si-Runx3组,每组8只.应用免疫荧光染色和Western blot检测小鼠心脏中Runx3、α-SMA和Col Ⅰ的水平,采用超声心动图评价心功能,免疫组化方法检测Ki67阳性细胞.体外实验中,从1～3d龄的C57BL/6小鼠中分离心脏成纤维细胞,观察TGF-β1以不同浓度和刺激时间对细胞中Runx3蛋白影响,并分析Runx3基因敲除对心脏成纤维细胞的Col Ⅰ合成和增殖的响.结果 免疫荧光染色和Western blot结果,随着MI时间的延长,小鼠纤维化区域Runx3、α-SMA和Col Ⅰ表达上调.MI后28 d,与注射si-NC小鼠相比,注射si-Runx3小鼠左心室射血分数(ejection fraction,EF)、缩短分数(shortened fraction,FS)、心输出量(cardiac output,CO).上调(P＜0.05),而舒张末期左心室内径(decreased left ventricular end-diastolic diameter,LVIDd)和收缩期左心室内径(decreased left ventricular,LVIDs)下调(P＜0.05).MI后28 d,MI诱导的Runx3和α-SMA表达和对Ki67阳性细胞增殖作用被si-Runx3阻断.TGF-β1以浓度和时间依赖性方式上调Runx3蛋白表达;Runx3基因敲除不仅抑制TGF-β1诱导的心脏成纤维细胞分化,减少Col Ⅰ合成,而且减弱了心脏成纤维细胞增殖.结论 Runx3参与了心脏成纤维细胞分化和增殖.
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