探讨RNA干扰中性粒细胞相关载脂蛋白(NGAL)基因的表达对人脑胶质瘤细胞凋亡的影响及机制。
方法提取人脑胶质瘤组织及人脑胶质瘤SHG-44、U87、U251细胞中的蛋白，Western blot检测NGAL的表达；将siRNA-NC、NGAL-siRNA1、NGAL-siRNA2、NGAL-siRNA3转染U251细胞，未转染任何siRNA的作为对照组，各组细胞转染48 h后，Western blot检测NGAL的蛋白表达；流式细胞仪检测细胞转染48 h的细胞凋亡，Western blot检测活化的含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶3(Cleaved Caspase-3)、Notch1、发状分裂相关增强子1(Hes1)蛋白表达。
结果脑胶质瘤组织中NGAL的mRNA和蛋白表达(0.458±0.042)显著高于瘤旁组织(0.098±0.015)(tmRNA＝7.113，PmRNA＝0.003；t蛋白表达＝8.532，P蛋白表达＝0.002)，U251细胞中NGAL的蛋白表达最高，选择作为后续研究；NGAL-siRNA组细胞凋亡率[(15.62±1.94)%]及leaved Caspase-3(0.094±0.021)蛋白表达显著高于对照组[(2.18±0.67)%，0.032±0.015]，Notch1(0.204±0.028)、Hes1(0.103±0.019)蛋白表达显著低于对照组(0.453±0.041、0.215±0.029)(t凋亡率＝9.995，P凋亡率＝0.001；tCleaved Caspase-3＝5.898，PCleaved Caspase-3＝0.006；tNotch1＝8.112，PNotch1＝0.003；tHes1＝8.824，PHes1＝0.003)。
结论NGAL基因在人脑胶质瘤组织及细胞中高表达，通过RNA干扰沉默NGAL表达可抑制人脑胶质瘤细胞增殖及促进细胞凋亡，其机制与Notch信号通路有关。