【摘 要】
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目的 探讨长链非编码RNA(LncRNA)HOTAIR对宫颈癌Hela细胞增殖、凋亡和上皮细胞-间充质转化(EM T)的影响及潜在的作用机制.方法 收集培养的宫颈癌细胞(Hela细胞)、人永生化宫颈上皮细胞(H8细胞),同时收集宫颈癌组织、癌旁正常组织标本,利用实时荧光定量PCR检测LncRNA HOTAIR、miR-20a-5p和KIF26B的mRNA表达;分别下调LncRNA HOTAIR、miR-20a-5p和KIF26B的表达,MTT试验检测Hela细胞增殖能力,Western blot检测Hel
【机 构】
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南方医科大学附属东莞医院/东莞市人民医院妇产科,广东东莞523000
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目的 探讨长链非编码RNA(LncRNA)HOTAIR对宫颈癌Hela细胞增殖、凋亡和上皮细胞-间充质转化(EM T)的影响及潜在的作用机制.方法 收集培养的宫颈癌细胞(Hela细胞)、人永生化宫颈上皮细胞(H8细胞),同时收集宫颈癌组织、癌旁正常组织标本,利用实时荧光定量PCR检测LncRNA HOTAIR、miR-20a-5p和KIF26B的mRNA表达;分别下调LncRNA HOTAIR、miR-20a-5p和KIF26B的表达,MTT试验检测Hela细胞增殖能力,Western blot检测Hela细胞内凋亡相关蛋白Bax、Bcl-2和EM T相关蛋白E-cad-herin、N-cadherin的表达,流式细胞仪检测Hela细胞凋亡情况.miRanda和双荧光素酶报告基因试验分析LncRNA HOTAIR和miR-20a-5p之间的作用靶点及相关性,TargetScan和双荧光素酶报告基因试验分析miR-20a-5p与KIF26B之间的作用靶点及相关性;检测LncRNA HOTAIR通过miR-20a-5p对Hela细胞增殖、凋亡和EMT的影响.结果 Hela细胞内LncRNA HOTAIR和KIF26B表达明显高于H8细胞(P<0.01),miR-20a-5p表达明显低于H8细胞(P<0.01).宫颈癌组织中LncRNA HOTAIR和KIF26B表达明显升高(P<0.01),miR-20a-5p表达明显降低(P<0.01).LncRNA HOTAIR、KIF26B表达降低后明显抑制了Hela细胞增殖与EMT,促进Hela细胞凋亡;LncRNA HOTAIR靶向miR-20a-5p,miR-20a-5p靶向KIF26B;miR-20a-5p表达降低后促进Hela细胞增殖与EMT,抑制细胞凋亡;过表达LncRNA HOTAIR通过miR-20a-5p促进Hela细胞增殖与EMT,抑制Hela细胞凋亡.结论 LncRNA HOTAIR通过miR-20a-5p/KIF26B轴抑制Hela细胞凋亡,促进了癌细胞增殖及EM T.
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