荧光定量PCR方法检测禽白血病病毒的研究

来源 :内蒙古农业大学学报:自然科学版 | 被引量 : 0次 | 上传用户:bgtbhu888
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根据禽白血病病毒各亚群pol基因序列相对保守的特点,在其保守区内设计了1对引物,进行RT-PCR反应,扩增产物为214 bp,将该产物连接T载体作为Real-time PCR反应的标准品,利用SYBR Green I染料进行Real-time PCR反应,建立了标准曲线,并进行反应灵敏性、特异性和重复性试验。试验结果表明:标准曲线线性关系R值均为0.999以上,检测极限约为8.21E+01拷贝数质粒DNA,比RT-PCR灵敏100倍以上;特异性分析表明只有禽白血病病毒能检测到特异性的熔解度峰值;批内和批间
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