人口腔细胞P450、GST基因多态性研究

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目的 探讨人口腔细胞CYP 1A1与 2E1,GSTM1和GSTT1等等位基因的多态性 ,为分子流行病学研究提供一个收集基因样品的简易、可靠的方法。方法 收集人口腔洗液 4 0ml,加 10ml异丙醇固定 ,经蛋白酶K消化 ,酚、氯仿抽提 ,酒精沉淀提取口腔细胞DNA ,结合PCR -RFLP技术分析 32例正常人CYP 1A1与 2E1、GSTM 1和GSTT1基因多态性。结果 32例口腔上皮细胞DNA含量为 2 2 .36~ 330 .70 μg ,均数12 7.38μg ,中位数 113.84 μg。琼脂糖凝胶电泳显示 :所有 32例样品均具有高分子量DNA。其中 31例口腔细胞DNA能扩增 β- globin基因片段。CYP 1A1(Msp1) 3′端侧翼T→C突变型纯合子 (mm)占 2 2 .6 % ,突变型等位基因占 4 8.4 % ,CYP 2E1(Rsa1) 5′端调控区C→T突变型纯合子占 (mm) 6 .4 % ,突变型等位基因占 2 9.0 % ,GSTM1缺失占 4 5 .2 % ,GSTT1缺失 4 8.4 %。结论 从人口腔洗液上皮细胞中可提取到足够量的高分子DNA用以进行多种基因多态性分析 ,是一种可应用于大规模人群进行分子流行病学研究的可靠方法。
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