【摘 要】
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为了建立特异、灵敏及快速的猪星状病毒3型(PAstV3)检测方法并应用于临床检测,根据Gen-Bank登录的PAstV 3序列,在ORF1b保守区设计特异性引物和TaqMan探针;经过反应体系和反应
【机 构】
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广西大学动物科学技术学院,广西南宁 530005;广西中医药大学第一附属医院,广西南宁530024
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为了建立特异、灵敏及快速的猪星状病毒3型(PAstV3)检测方法并应用于临床检测,根据Gen-Bank登录的PAstV 3序列,在ORF1b保守区设计特异性引物和TaqMan探针;经过反应体系和反应条件优化,对建立的实时荧光定量RT-PCR方法进行敏感性、特异性测定,并初步应用于临床粪便样品的检测.结果 显示,该方法标准曲线线性关系良好,R2值达到0.997 1;与多种常见的猪病病毒均无交叉反应,特异性良好.与常规PCR相比,该检测方法敏感性是常规PCR方法的100倍,敏感性较高,批内、批间重复性试验的变异系数均小于2.0％,重复性良好.使用该方法对临床收集的30份疑似PAstV3粪便样本进行检测,阳性率为40％,检出率高于常规PCR方法.上述结果表明,该方法的建立为PAstV3的诊断及流行病学调查提供了快速、准确的检测手段.
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