【摘 要】
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根据GenBank公布的日本脑炎病毒(Japanese encephalitis virus,JEV)SA14-14-2减毒株的核苷酸序列,设计并合成一对特异性引物,应用RT-PCR方法扩增出编码JEV囊膜蛋白抗原域Ⅲ的
【机 构】
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南京农业大学农业部动物疫病诊断与免疫重点开放实验室,南京农业大学农业部动物疫病诊断与免疫重点开放实验室
【基金项目】
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国家高技术研究发展计划(863计划)
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根据GenBank公布的日本脑炎病毒(Japanese encephalitis virus,JEV)SA14-14-2减毒株的核苷酸序列,设计并合成一对特异性引物,应用RT-PCR方法扩增出编码JEV囊膜蛋白抗原域Ⅲ的基因(EⅢ),将其连接入pMD18-T载体,经测序后克隆入原核表达载体pET-32a(+),构建原核表达载体pET-EⅢ.阳性质粒转化感受态大肠杆菌BL21(DE3),经IPTG诱导,JEV- EⅢ基因获得表达,经细胞定位分析,目的蛋白以包涵体的形式存在于大肠杆菌中.通过改变IPTG的浓度
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