【摘 要】
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通过重组DNA技术,经RT-PCR从人外周血淋巴细胞中获得全长cDNA序列,连入pcDNA3.1(+)中,构建了可以在哺乳动物细胞稳定表达的质粒pcDNA-hGM-CSF,并用脂质体法转入CHO细胞,经G41
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通过重组DNA技术,经RT-PCR从人外周血淋巴细胞中获得全长cDNA序列,连入pcDNA3.1(+)中,构建了可以在哺乳动物细胞稳定表达的质粒pcDNA-hGM-CSF,并用脂质体法转入CHO细胞,经G418筛选,建立起长期稳定分泌hGM-CSF的细胞株,在三个月的观察中分泌量恒定在43.49±8.456ng/ml,活性单位达480IU/ml/105个细胞,Westem-bl ot证实该细胞株分泌的bGM-CSF有6种分子量,主带在17KD及35KD左右,提示其有不同程度糖基化.
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