【摘 要】
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目的筛选不同饲料硒(selenium,Se)水平饲喂大鼠时,不同组织中稳定表达的内参基因(reference genes,RGs)。方法 24只断乳雄性SD大鼠在缺Se饲养5周后,随机均分为4组,分别以Se含
【机 构】
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深圳市慢性病防治中心; 中国疾病预防控制中心营养与健康所;
【基金项目】
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国家自然科学基金(No.81172669,81372993);深圳市医疗卫生三名工程(No.营养SZSM201611017)
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目的筛选不同饲料硒(selenium,Se)水平饲喂大鼠时,不同组织中稳定表达的内参基因(reference genes,RGs)。方法 24只断乳雄性SD大鼠在缺Se饲养5周后,随机均分为4组,分别以Se含量<0.01、0.25、3、5 mg/kg饲料饲喂4周后处死,取肝、睾丸、骨骼肌、脂肪组织等样品待检。以荧光定量PCR检测Actb、Atp5f1、B2m、Gapdh、Gusb、Hprt、Pgk1、Ppia、Rplp2、Rps18、Tbp、Ywhaz等12个候选内参基因的mRNA水平,以geNorm、NormFinder、BestKeeper、Delta CT和RefFinder等方法对其表达稳定性进行评价。结果各组织中稳定性排名前4的内参基因是:肝中Ppia>Atp5f1>Rplp2>Hprt;睾丸中Ywhaz>Atp5f1>Rplp2>Ppia;骨骼肌中Tbp>Ppia>B2m>Rps18;脂肪组织中Hprt>Tbp>Atp5f1>Pgk1;综合4种组织,则Rps18>Hprt>Rplp2>Atp5f1。结论分析不同饲料Se水平饲养大鼠的目标基因表达水平时,应根据组织类型选择适宜的内参基因。
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