【摘 要】
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目的 建立人乳头瘤病毒重组蛋白疫苗(HPV16 L2E6E7)酶联免疫的检测方法,用于疫苗发酵过程中的重组蛋白表达的监控.方法 用常规方法制备兔抗HPV16 L2E6E7多克隆抗体作为包被抗
【机 构】
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浙江省医学科学院病毒病研究所,杭州310013;浙江普康生物技术有限公司,杭州310013
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目的 建立人乳头瘤病毒重组蛋白疫苗(HPV16 L2E6E7)酶联免疫的检测方法,用于疫苗发酵过程中的重组蛋白表达的监控.方法 用常规方法制备兔抗HPV16 L2E6E7多克隆抗体作为包被抗体,商品化小鼠抗HPV16 E7单克隆抗体为检测抗体,夹心ELISA方法检测HPV16 L2E6E7抗原参考品,建立抗原标准曲线,确定线性范围及检测限,同时验证该方法的特异性.结果 建立了检测HPVI6 L2E6E7抗原含量的夹心ELISA方法,抗原参考品系列浓度在19.53～1 250 ng·mL-1内有很好的线性(R2＞0.99)和回收率(90％～110％);特异性好,不受发酵液中宿主菌蛋白的干扰.结论 建立了人乳头瘤病毒重组蛋白疫苗重组抗原含量的测定方法,为该疫苗的发酵工艺的质控提供了有效技术手段.
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