【摘 要】
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通过生物信息学筛选出来源于超嗜热菌Thermotoga petrophila（DSM13995）的普鲁兰酶基因,以从德国菌种保藏中心购买的基因组作为出发材料,克隆出普鲁兰酶基因TP-pul A;通过二步PC
【机 构】
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河南农业大学生命科学学院农业部农业微生物酶工程重点实验室,河南仰韶生化工程有限公司
【基金项目】
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科技部“十二五”农村领域科技计划项目（2013AA102101-2）, 河南省重点科技攻关计划项目（142102110086）
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通过生物信息学筛选出来源于超嗜热菌Thermotoga petrophila（DSM13995）的普鲁兰酶基因,以从德国菌种保藏中心购买的基因组作为出发材料,克隆出普鲁兰酶基因TP-pul A;通过二步PCR方法构建含有该嗜热普鲁兰酶基因的载体pET21a-TP-pul A;将重组质粒转入大肠杆菌Rosetta（DE3）中测定其酶学性质。结果表明,TP-pul A为Ⅰ型普鲁兰酶,最适pH值为6.4,最适温度是85℃,半衰期为26.28 h,Na~＋、K~＋、Ca~（2＋）、Mg~（2＋）对其酶活性有明显的
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