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目的：建立高灵敏度和特异性的腺激肽释放酶2（hk2）酶联免疫吸附试验（ELISA）。方法：以hk2单克隆抗体（hk2mAb）为包被抗体,hk2多克隆抗体（hk2pAb）和辣根过氧化酶（HRP）标记抗IgG为检测抗体,建立检测hk2双抗体夹心ELISA法,并对其灵敏度、精密度、准确度和稳定性等方法学进行评价。结果：hk2mAb、hk2pAb和HRP标记IgG的最佳稀释工作浓度分别为1∶100、1∶2 000和1∶8 000。该法线性范围为50～800 ng/L、线性良好（R2=0.99）、灵敏度为28 ng